桂 枝 茯 苓 丸 出 自 張 仲 景 的 《金 匱 要 略》，由 桂 枝、茯苓、牡丹皮、桃仁、芍藥等五味中藥組成，具有 活血，化瘀，消癥之功效，是目前臨床治療婦科血 瘀證的首 選 藥 物 之 一。透皮貼劑具有血藥濃度平 穩(wěn)持久，不 良 反 應(yīng) 小，用 藥 次 數(shù) 少，使 用 方 便 等 優(yōu) 點(diǎn)。中醫(yī)認(rèn)為，臍中為通五 臟 而 真 神 來 往 之 門。 臍部周圍皮膚角質(zhì)層較薄，是經(jīng)皮給藥的理想給藥 部位之一。桂枝茯苓丸方中桂枝和牡丹皮含有揮 發(fā)性有效成 分 肉 桂 酸 和 丹 皮 酚 等，容 易 透 皮 吸 收， 并且能促進(jìn)方中其他有效成分如芍藥苷和苦杏仁 苷的吸收。因此，將桂枝茯苓丸制成外敷臍部的 透皮貼劑，具有獨(dú)特的優(yōu)勢。本文報(bào)道桂枝茯苓透 皮貼劑的含量及體外釋放度測定方法，旨在為該產(chǎn) 品的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

１ 儀器與試藥

１．１ 儀器

Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色譜儀（美國安 捷倫公司，包括 Ｇ１３７９Ａ 在線脫氣機(jī)，Ｇ１３１１Ａ 四元 梯度 泵，Ｇ１３１３Ａ 自 動(dòng) 進(jìn) 樣 器，Ｇ１３１６Ａ 柱 溫 箱， Ｇ１３１５Ｂ二極管陣列檢測器，Ａｇｉｌｅｎｔ色譜工 作 站）； ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８色譜柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５ μｍ）；ＫＱ５２００DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山舒美超聲儀器有限公司）；ＭＥＴＴＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯＡＧ１３５十 萬分之一電子天平（瑞士）；ＤＫ－Ｓ２４電熱恒溫水浴 鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）

１．２ 試藥

芍藥苷對照品（批號(hào)１１０７３６－２０１４３８）， 丹皮酚 對 照 品（批 號(hào) １１０７０８－２０１４０７），肉 桂 酸 對 照 品（批 號(hào) １１０７１０－２０１０１６），均購自中國食品藥品檢 定研究院；桂 枝 茯 苓 透 皮 貼 劑（自 制，批 號(hào)１６０３０５，１６０３０６，１６０３０７，１６０３１４，１６０３１５，１６０３１６）；甲 醇、磷 酸為分析純，其余試劑均為色譜純，水為超純水。

２ 方法與結(jié)果

色譜柱：ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８ （２５０ｍｍ×４．６ ｍｍ，５μｍ）；流 動(dòng) 相：乙 腈 （Ａ）－ ０．１％磷酸水 溶 液（Ｂ）；梯 度 洗 脫 程 序（０→１７ ｍｉｎ， １４％～４５％Ａ；１７→２４ｍｉｎ，４５％～４４％Ａ；２４→２６ ｍｉｎ，４４％～１４％Ａ；流 速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１）；柱 溫： ３０℃；檢測波長：２３０ｎｍ，２７４ｎｍ；進(jìn)樣量５μＬ。在 該色譜條件 下，貼 劑 中 芍 藥 苷、肉桂酸和丹皮酚色 譜峰與其他成分色譜峰分離良好，分離度符合要求 （Ｒ＞１．５），結(jié)果見圖１。

取 芍 藥 苷、肉 桂 酸、丹皮酚對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并定 容至刻度，搖勻，制成芍藥苷４０２μｇ·ｍＬ－１、肉桂酸 ８．０８μｇ·ｍＬ－１、丹皮酚２００μｇ·ｍＬ－１的混合對照品 溶液，備用。?。保官N貼劑，揭除防 黏紙，剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇５０ｍＬ， 精密稱 定，超 聲 處 理（功 率２５０ Ｗ，頻 率 ４０ｋＨｚ）１ ｈ，放冷，再精 密 稱 定，用 甲 醇 補(bǔ) 足 減 失 質(zhì) 量，搖 勻， 濾過，取續(xù)濾液，備用。按桂枝 茯苓透 皮 貼 劑 處 方 及 制 備 工 藝，分 別 制 成 空 白 貼 劑、缺赤芍、桂 枝 和 牡 丹 皮 的 陰 性 樣 品，按“２．１．３” 項(xiàng)下方法制成空白貼劑及陰性樣品溶液，備用。在 與對照品色譜相同的保留時(shí)間處，貼劑基質(zhì)及陰性 對照無干擾。取同一批貼劑６片，按“２．１．３” 項(xiàng)下方法平行制備６份供試品溶液，每份按“２．１．１” 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果芍藥苷、肉桂酸、丹皮 酚含量的 ＲＳＤ分別為２．１８％，２．８７％，４．１３％。表明 方法重復(fù)性較好。?。保官N空白貼劑共６份，揭 除防黏紙，剪碎，置于５０ｍＬ量瓶中，分別精密吸取 混合對照品 溶 液，加 入 其 中，并 用 釋 放 介 質(zhì) 稀 釋 定 容，進(jìn)樣２０μＬ，按“２．１．１”項(xiàng)下色譜條件，測定峰面 積，并計(jì)算回收率及 ＲＳＤ。結(jié)果芍藥苷的平均回收 率為９８．８６％，ＲＳＤ 為２．５４％；肉 桂 酸 的 平 均 回 收 率為１０３．２８％，ＲＳＤ為１．７０％；丹皮酚的平均回收 率為９９．３３％，ＲＳＤ 為１．１８％，表明該方法準(zhǔn)確度 良好。

３ 討論

為使各成分均有較好的靈敏度和響應(yīng)值，本文 采用雙波長切換法同時(shí)測定芍藥苷、肉桂酸以及丹 皮酚這３個(gè)指標(biāo)成分。流動(dòng)相的選擇主要參考前期所做的工作。芍 藥 苷 是 雙 環(huán) 單 萜 類，極 性 很 大， 水溶性較好，脂 溶 性 差，肉桂酸和丹皮酚是極性較 小的揮發(fā)性物質(zhì)，分別含有羧基和酚羥基。曾用乙 腈－水和甲醇－水系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果 顯 示 乙 腈－水 系 統(tǒng)對供試品有較好的分離性能，且色譜峰保留時(shí)間 較短。但乙腈－水系統(tǒng)仍有拖尾現(xiàn)象，且未達(dá)到基線 分離。以醋酸調(diào)節(jié)水相ｐＨ 后可以改善分離度和拖 尾現(xiàn)象，但醋 酸 在 低 波 長 吸 收 干 擾 較 大，不 利 于 定量分析，故最 終 選 用 乙 腈－０．１％磷 酸 水 溶 液 為 流 動(dòng) 相，采用梯度 洗 脫，優(yōu) 化 洗 脫 條 件，使 芍 藥 苷、肉 桂 酸、丹皮酚與其他成分分離良好且分析時(shí)間較短。