1 儀器與試藥 

1．1 儀器 

Waters 2695 型高效液相色譜儀，包括 Waters 2998 DAD 型檢測(cè)器( 美國(guó)沃特世科技公司) ; Agilent Zorbax Eclipse SB － C18 色 譜 柱 ( 美 國(guó) 安 捷 倫 科 技 公 司 ) ; XS 204ME 型電子天平( 瑞士梅特勒科技公司) ; Milli － Q IQ7000 型超純水儀( 德國(guó)默克密理博科技公司) ; KQ － 300TDE 型超聲波清洗機(jī)( 昆山舒美超聲設(shè)備公司) 。 

1．2 試藥 

復(fù)方夏天無(wú)片(江西天施康中藥股份有限公司，批 號(hào)分別為 190405，180721，181215，規(guī)格為每片 0． 32 g)原 阿片堿對(duì)照品( 批號(hào)為 110853 － 201805，含量為99． 6%)， 苯甲酰烏頭原堿對(duì)照品( 批號(hào)為 111794 － 201705，含量為 99． 1% ) ，均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院; 乙腈、甲醇 ( 美國(guó) Fisher 集團(tuán)) 均為色譜純; 乙酸銨、冰乙酸、磷酸 ( 上?；瘜W(xué)試劑廠) 均為分析純; 超純水(自制)。

2 方法與結(jié)果

色譜柱: Agilent Zorbax Eclipse SB － C18 柱( 250 mm × 4． 6 mm，3． 5 μm) ; 流動(dòng)相: 0． 1% 冰乙酸溶液( A) － 乙腈 ( B) ，梯度洗脫( 0 ～ 5 min 時(shí) 94% A，5 ～ 27 min 時(shí) 94% A → 58% A，27 ～ 30 min 58% A → 94% A，30 ～ 35 min 94% A) ; 柱溫: 30 ℃; 流速: 1． 0 mL /min; 檢測(cè)波長(zhǎng): 264 nm;進(jìn)樣量: 25 μL。取原阿片堿和苯甲酰烏頭原堿標(biāo)準(zhǔn)品各 25． 0 mg， 精密稱(chēng)定，置 50 mL 容量瓶中，加 1% 鹽酸溶液 5． 0 mL 及甲醇溶液 12． 0 mL，超聲溶解，取出，放冷，加 70% 甲 醇至刻度( 每 1 mL 含原阿片堿和苯甲酰烏頭原堿均為 0． 5 mg) ，搖勻，即得混合對(duì)照品溶液。取復(fù)方夏天無(wú)片 樣品 10 片，研細(xì)，取約 1． 0 g，精密稱(chēng)定，置 50 mL 容量瓶 中，加 70 % 甲醇約 40 mL，超聲提取( 功率為 300 W，頻率 為 60 Hz) 約 25 min; 取出，放冷，加 70 % 甲醇至刻度，搖 勻，0． 45 μm 微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按 處方和工藝制備缺夏天無(wú)、夏天無(wú)總堿和制草烏的陰性樣 品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對(duì)照品溶液。

3 討論

取原阿片堿對(duì)照品，配制質(zhì)量濃度為 10． 0 μg / mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，加 70 % 甲醇至刻度，搖勻，即得波長(zhǎng)測(cè)試 溶液，依法配制苯甲酰烏頭原堿波長(zhǎng)測(cè)試溶液。開(kāi)啟紫外 可見(jiàn)分光光度計(jì)，在 200 ～ 400 nm 波段對(duì)上述溶液分別 進(jìn)行光譜掃描。結(jié)果原阿片堿和苯甲酰烏頭原堿分別在 236 nm 和 290 nm 波長(zhǎng)處有最大吸收，為使 2 種待測(cè)成分 有較好的響應(yīng)，本研究中選擇 264 nm 作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

免責(zé)聲明：文章僅供學(xué)習(xí)和交流，如涉及作品版權(quán)問(wèn)題需要我方刪除，請(qǐng)聯(lián)系我們，我們會(huì)在第一時(shí)間進(jìn)行處理。