淀粉酶的生產(chǎn)來(lái)源單一,應(yīng)用于生產(chǎn)的 菌株多為絲狀真菌,且商用的真菌葡萄糖淀粉酶的應(yīng)用具 有一定的局限性,如中等的熱穩(wěn)定性,無(wú)法適應(yīng)復(fù)雜多變 的工業(yè)生產(chǎn)環(huán)境等。可以通過(guò)廣泛地篩選得到具 有高產(chǎn)淀粉酶能力的微生物、優(yōu)化產(chǎn)酶條件,或者以菌株 誘變等方式提升已有菌株的產(chǎn)淀粉酶能力,增強(qiáng)酶的熱穩(wěn) 定性,提高酶活力,應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn),以擴(kuò)大淀粉酶的生產(chǎn) 來(lái)源。THZ-98A恒溫振蕩培養(yǎng)箱:上海一恒科技有限公司; INESA-721N可見(jiàn)分光光度計(jì)、GI54IW高壓滅菌器、DW86L626超低溫保存箱:上海力辰邦西儀器科技有限公司; T100基因擴(kuò)增儀:伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司;PS300電泳 儀:上海天能科技有限公司;Gel Doc Go凝膠成像系統(tǒng):伯 樂(lè)Bio-Rad公司;常壓室溫等離子體(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)誘變儀:昆山超聲儀器有限公 司;AR223CN電子天平:奧豪斯儀器有限公司。
選取致死率為98%的誘變菌液,涂布于透明圈檢測(cè)培 養(yǎng)基,30 ℃倒置培養(yǎng)2~3 d,按1.3.1的方法測(cè)定透明圈直徑, 初步篩選出淀粉酶活力升高的陽(yáng)性突變菌株。同時(shí),挑取單 菌落接種至5 mL發(fā)酵培養(yǎng)基,30 ℃、180 r/min條件下培養(yǎng) 過(guò)夜,取菌液按1%(V/V)的接種量接種于100 mL發(fā)酵培 養(yǎng)基,于30 ℃、180 r/min條件下振蕩培養(yǎng)192 h。采用DNS 法測(cè)定淀粉酶活力,篩選出高產(chǎn)淀粉酶活力的誘變菌株。