1 儀器與試劑試藥
生物顯微鏡 BX51 (OLYMPUS); 1260 高效液相 色譜儀 (Agilent); GR-202 電子天平 (日本 A \ D 公 司); 昆山舒美KQ-500VDE 型雙頻數(shù)控超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司); DK- 98 - 11A 電熱恒溫水浴鍋 (天津泰斯特儀器有限公司); 101-1A 型電熱鼓風(fēng)干 燥箱 (天津市泰斯特儀器有限公司); SX2-4-10 型 高溫箱式電爐 (上海博迅實(shí)業(yè)有限公司) 等; 中藥手 工切片刀 (深圳眾達(dá))。 藜蘆莖葉對照藥材 (長春市食品藥品檢驗(yàn)中心自 制并經(jīng)專家鑒定,批號: 201607); 白藜蘆醇對照品 (中檢院,批號: 111535-201703); 色譜甲醇 (Fisher Chemical); 乙醇 (北京化工廠) 等。共選擇 10 批樣 品為 2015 年 5 月—2016 年 10 月之間采集,均為野生 樣品,并經(jīng)過吉林中醫(yī)藥大學(xué)教授鑒定為百合科植物 藜蘆的干燥莖葉,見表 1。
2 方法與結(jié)果
2. 1 性狀
根據(jù)收集到的樣品進(jìn)行性狀研究,其性狀特征大 致如下: 本品全長約 30 ~ 100cm,莖圓柱狀,中空, 表面灰綠色或棕褐色,莖基部常殘留黑褐色網(wǎng)狀纖 維; 葉片橢圓形,基部抱莖,全緣,兩面無毛,具數(shù) 條明顯的平行脈; 體輕質(zhì)脆,氣微。
2. 2 顯微特征
植物可以通過具有專屬性的顯微特征而進(jìn)行真?zhèn)? 的鑒別。通過顯微鏡下觀察各樣品的粉末,發(fā)現(xiàn)其有 以下顯微特征: 本品粉末呈黃綠色或棕褐色,淀粉粒較多,呈圓形或橢圓形,直徑 4 ~ 20μm,多為單粒, 臍點(diǎn)點(diǎn)狀或呈人字狀; 草酸鈣針晶成束或散列于薄壁 細(xì)胞中,長約 40 ~ 150μm; 導(dǎo)管多為螺紋導(dǎo)管,亦有 網(wǎng)紋導(dǎo)管及梯紋導(dǎo)管,直徑 12 ~ 80μm; 葉表皮細(xì)胞 中可見氣孔,大小不一。
2. 3 TLC 鑒別
經(jīng)對不同展開條件進(jìn)行選擇,結(jié)果顯示,取本品 粉末 2g,加甲醇 30mL,超聲處理 20min,過濾,濾液 蒸干,殘?jiān)蛹状?2mL 溶解,作為供試品溶液。另取 藜蘆對照藥材同法制成對照藥材,作為對照藥材溶 液。照 薄 層 色 譜 法 ( 中 國 藥 典 2015 年 版 通 則 0502 ) 試驗(yàn),吸取上述 2 種溶液各 10μL,分別點(diǎn) 于同一硅膠 G 薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水 (15 ∶ 5 ∶ 0. 5) 為展開劑,展開,取出,晾干,噴以 10% 硫酸乙醇溶液,在 105℃ 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試 品色譜在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色 的斑點(diǎn)。該方法省時(shí)、簡便、直觀,并可以有效對藥 材真?zhèn)芜M(jìn)行鑒別。
3 討論
關(guān)于藜蘆地上部分的藥材標(biāo)準(zhǔn)相對落后, 已不能有效地評價(jià)藜蘆莖葉藥材的質(zhì)量。本研究參照 了中國藥典 2015 版藥材標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)的相關(guān)要求, 通過性狀特征可有效將其與不同來源及易混淆品種的 藜蘆如 毛 穗 藜 蘆、尖 被 藜 蘆、狹 葉 藜 蘆 等 進(jìn) 行 區(qū) 別; 顯微特征、TLC 等項(xiàng)可以進(jìn)一步有效鑒別藥 材真?zhèn)?,TLC 方 法 斑 點(diǎn) 清 晰、分 離 度 好; 水 分、灰 分、總灰分及酸不溶性灰分檢查等項(xiàng)可以有效評價(jià)藥 材的質(zhì)量; 通過多條件篩選后的 HPLC 法可有效測定 藜蘆莖葉中活性成分白藜蘆醇的含量。該方法簡單易 操作,可重復(fù)性及準(zhǔn)確度良好,有利于其標(biāo)準(zhǔn)限度的 制定及合理用藥。
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