1 試驗(yàn)材料
主要儀器與試驗(yàn)方法 1.1 材料與試劑 銀耳蒂頭,福建省祥云生物科技發(fā)展有限公司提 供。葡萄糖、95%乙醇、苯酚、硫酸,均為分析純。
1.2 儀器
BL1025A 型多功能料理機(jī),廣東美的生活電器 制造有限公司產(chǎn)品;RE- 52A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生化儀器廠產(chǎn)品;101- 2 型鼓風(fēng)干燥箱,上海浦東 榮豐科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;昆山舒美KQ- 300VDV 型三頻數(shù) 控超聲波清洗機(jī),昆山超聲儀器有限公司產(chǎn)品; TDL- 5 型低速臺(tái)式大容量離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀 器廠產(chǎn)品;722s 型可見分光光度計(jì),上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 銀耳蒂頭多糖含量的測(cè)定方法
采用苯酚硫酸法時(shí),精確稱取經(jīng)干燥至恒質(zhì)量 的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖 20 mg,用蒸餾水定容至 500 mL,分 別吸取 0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6, 1.8 mL,分別加蒸餾水補(bǔ)至 2.0 mL,加入質(zhì)量分?jǐn)?shù) 6%苯酚溶液 1.0 mL,再快速加入 5.0 mL 濃硫酸, 顯色后用冷水冷卻,于波長(zhǎng) 490 nm處測(cè)定吸光度,以 零管作空白對(duì)照。得線性方程:Y=0.398 6X+0.199 4, R2 =0.999 1。 根據(jù)銀耳蒂頭提取液中多糖的含量,取適宜濃 度樣品液 1.0 mL 按 1.3.1 操作,測(cè)吸光度,并以上述 標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖含量。
1.3.2 銀耳蒂頭粗多糖的超聲波提取工藝流程
將新鮮銀耳蒂頭烘干至恒質(zhì)量,粉碎,40 目過 篩。過篩后的銀耳蒂頭粉以料液比為 1∶40~1∶100 加入 50 ℃蒸餾水浸泡 10 min,按提取溫度為 50~ 80 ℃,超聲功率為 40~80 W 的條件提取 20~80 min, 將提取后的樣品液離心 15 min (轉(zhuǎn)速 3 000 r/min), 取上清液定容至 100 mL,稀釋至一定濃度后測(cè)定銀 耳多糖的含量,計(jì)算銀耳多糖得率。
1.3.3 單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)單因素試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見表 1。
根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果選定因素及水平進(jìn)行正交 試驗(yàn),確定超聲波提取銀耳蒂頭粗多糖的最佳工藝 參數(shù)。
1.3.4 驗(yàn)證試驗(yàn)
準(zhǔn)確稱取 1 g 銀耳蒂頭 5 份,以正交試驗(yàn)得出 的最佳提取工藝進(jìn)行 5 次平行驗(yàn)證試驗(yàn),并按照 1.3.2 中的試驗(yàn)方法進(jìn)行粗多糖含量的測(cè)定,得出驗(yàn) 證試驗(yàn)結(jié)果。 1.3.5 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用 DPS 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 料液比對(duì)銀耳蒂頭粗多糖提取率的影響
精確稱取 1 g 的銀耳蒂頭粉,分別選用料液比為 1∶60,1∶70,1∶80,1∶90,1∶100 在超聲功率 50 W 連續(xù)提取 1 h,溫度設(shè)置為 50 ℃,研究料液比 對(duì)銀耳蒂頭中粗多糖提取率的影響。 料液比對(duì)銀耳蒂頭粗多糖提取率的影響見圖 1。
由圖 1 可知,料液比對(duì)銀耳蒂頭粗多糖提取率 有較大的影響,隨著料液比的增加提取率先增后減, 料液比為 1∶80 時(shí),銀耳蒂頭粗多糖的提取率達(dá)到 最高,當(dāng)料液比超過 1∶80 時(shí)銀耳蒂頭粗多糖的提 取率略有下降。
2.2 超聲提取時(shí)間對(duì)銀耳蒂頭粗多糖提取率的影響
準(zhǔn)確稱取銀耳蒂頭粉各 1 g,在料液比為 1∶80, 超聲功率 50 W,提取溫度為 50 ℃時(shí)分別提取 20, 40,60,80,100 min,考查超聲提取時(shí)間對(duì)銀耳蒂 頭中粗多糖提取率的影響。
3 結(jié)論
(1) 銀耳蒂頭組織較緊密,不易干燥,不易煮 爛,因此在加工中常作為菌渣廢料。研究表明,銀 耳蒂頭含有豐富的多糖物質(zhì),可為其開發(fā)利用提供 理論基礎(chǔ)。采用超聲波提取的銀耳蒂頭多糖的物理 化學(xué)性質(zhì)、生物活性機(jī)理、功效因子還需進(jìn)一步 研究。
(2) 與傳統(tǒng)的水提法相比,用超聲波提取銀耳蒂頭粗多糖可有效提高多糖的提取速率,減少銀耳 蒂頭粗多糖的提取時(shí)間。正交試驗(yàn)得到的最佳工藝 條件為超聲波提取溫度 70 ℃,超聲功率 50 W,料 液比 1∶90 條件下提取 100 min 時(shí),提取率 36.38%。
免責(zé)聲明:文章僅供學(xué)習(xí)和交流,如涉及作品版權(quán)問題需要我方刪除,請(qǐng)聯(lián)系我們,我們會(huì)在第一時(shí)間進(jìn)行處理。