脂質(zhì)納米粒（lipid nanoparticle，NP）是基于脂 質(zhì)的極有效的藥物傳輸系統(tǒng)， 主要分為固體脂質(zhì) 納米粒（solid lipid nanoparticle，SLN）和納米結(jié)構(gòu) 脂 質(zhì) 載 體 （nanostructured lipid carrier，NLC）兩種。 NLC 由 SLN 改進而成，它以一定比例的液態(tài) 脂質(zhì)和固態(tài)脂質(zhì)為混合類脂，代替 SLN 中的固態(tài) 脂質(zhì)作為載體材料。 與傳統(tǒng)的基于液態(tài)脂質(zhì)的給 藥系統(tǒng)（乳液、脂質(zhì)體等）相比，NLC 有更多優(yōu)點： 高穩(wěn)定性、高包封率；保證親脂性成分被保護、控 制和靶向釋放，提高了生物利用度，且低毒性，可 低價工業(yè)化生產(chǎn)等。

1 材料與儀器

1.1 材料

白藜蘆醇（Res，98%，上海德恩得醫(yī)藥科技有 限公司），亞麻籽油（加拿大 TA Foods 公司），中鏈 甘油三酯（MCT，印度尼西亞 Britz 公司），單硬脂 酸甘油酯（GMS，莘縣新星油脂有限公司），六聚甘 油單硬脂酸酯（P6，上海日光化學(xué)貿(mào)易有限公司）， 水性單甘脂（廣州勝欣化工科技有限公司），甘油 （Biosharp 公 司），1，1-二 苯 基-2-苦 肼 基（DPPH， 東京化成工業(yè)株式會社），硫氰酸銨（上海麥克林 生化科技有限公司），2-硫代巴比妥酸（TBA，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 設(shè)備與儀器

FB-110Q 高壓均質(zhì)機， 上海勵途機械設(shè)備工 程有限公司；RW20 型數(shù)顯型懸臂攪拌器，德國 IKA 公司；EMS-20 水浴磁力攪拌器， 金壇市岸頭 儀都儀器廠；JEM-2100 透射電子顯微鏡， 日本電 子株式會社；a-1900PC 紫外可見分光光度計，上海譜元儀器有限公司；D8-Discover X 射 線 衍 射 儀，德國 Bruker 公司；DSC-8000 差式掃描量熱分 析儀，美國 PerkinElmer 公司；N4 Plus 亞微米粒度 分 析 儀， 美 國 Beckman Coulter 公 司；DNP-9052 電熱恒溫培養(yǎng)箱， 上海精宏實驗設(shè)備有限公司； KQ-250DE 型數(shù)顯超聲波清洗器， 昆山舒美超聲儀 器有限公司；ZF-2 型三用紫外儀， 上海市安亭電 子儀器廠。

2 試驗方法

采用熱高壓均質(zhì)法制備 NLC。分別稱取一定 量的單硬脂酸甘油酯、 中鏈甘油三酯、 水性單甘 脂、六聚甘油單硬脂酸酯，70 ℃混勻后加入白藜蘆 醇和亞麻籽油，繼續(xù)攪拌至形成油相，將同溫度的 去離子水和甘油混勻后邊攪拌邊加入到油相中， 以上混合物繼續(xù)攪拌， 最后通過預(yù)熱的高壓均質(zhì) 機處理， 高溫液體冷卻后得白藜蘆醇和亞麻籽油 復(fù)配的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體（RL-NLC）。樣品稀釋后用 N4 Plus 亞微米粒度分析儀測 量其粒徑分布，測量溫度 25 ℃，測量角度 90°，平 衡時間 10 min。樣品稀釋后滴在銅網(wǎng)上，用 1％磷鎢酸水溶液 負染，風(fēng)干后放在透射電鏡下觀察。繪制 Res 在 307 nm 處的標準曲線，采用紫外 分光光度法測定 Res 的含量和包封率。 量取 60 μL 樣品（RL-NLC），乙醇稀釋至 25 mL，超聲破乳 30 min 后測得在 307 nm 處的吸光度，代入標準曲 線方程計算出 Res 的含量 W1。用透析袋法進行體外模擬釋放研究， 釋放介 質(zhì)為水、吐溫 80 和乙醇（80∶2∶20，V/V）。 白藜蘆 醇乙醇溶液（R-Ethanol）為 直 接 把 Res 溶 解 在 乙 醇中形成的液體。 試驗時將 2 mL RL-NLC 或 REthanol 樣品置于截留分子質(zhì)量為 10 ku 的經(jīng)浸泡 處理的透析袋中，夾緊兩端，然后懸浮于盛有 200 mL 釋放介質(zhì)的燒杯中，37 ℃水浴條 件 下 緩 慢 攪 拌。 分別在 0.5，1，1.5，2，4，6，8，10，12 和 24 h 時， 取出 1 mL 釋放介質(zhì)， 同時補充 1 mL 同溫度的釋 放介質(zhì)， 稀釋并用 0.45 μm 膜過濾后檢測 Res 的 含量，繪制 Res 的累積釋放曲線。

3 結(jié)果和討論

測 得 RL-NLC 的 粒 徑 為 104.9 nm ± 3.4 nm， PDI 為 0.216 ± 0.025。 PDI 用于衡量顆粒的粒徑分 布寬度，一般來說，PDI 越大，表示顆粒大小相差 越大，PDI 越小，表示顆粒大小越均一，該體系的PDI<0.3， 說明 RL-NLC 具有較窄的粒徑分布，均 一性較好。 RL-NLC 的 包 封 率 與 Res 的生物利用度相 關(guān)， 包封率高的載體的應(yīng)用價值往往較高。 RLNLC 的包封率為 98.4% ± 0.2%， 說明 Res 被很好 地包裹在脂質(zhì)顆粒中。長 鏈 脂 肪 酸 GMS 在 2θ=19.6°和 2θ=23.7°處 分別表現(xiàn)出 β 型（三斜晶體結(jié)構(gòu)）和 β′型（正交晶 體結(jié)構(gòu)） 晶體結(jié)構(gòu)的較強衍射峰， 而制備的 NLC 在 2θ=21.5°處也有衍射峰， 這是 α 型 （六邊形結(jié) 構(gòu)）晶體結(jié)構(gòu)的特征，這是因為在 NLC 的冷卻過 程中，GMS 傾向于無序的 α 型晶體結(jié)構(gòu)。 隨著時 間和溫度的變化，α 型會經(jīng)由 β' 型轉(zhuǎn)變?yōu)?β 型，但 是 NLC 中液態(tài)脂質(zhì)的加入會阻礙脂質(zhì)的結(jié)晶。DSC 可用于評價納米載體中脂質(zhì)的狀態(tài) 。 GMS 在 61.3 ℃處出現(xiàn)吸熱峰，而 RL-NLC 的升溫 曲線中吸熱峰為 41.5 ℃， 這說明在升溫過程中出 現(xiàn)了固體脂質(zhì)的融化現(xiàn)象， 由此證明 RL-NLC 中 的脂質(zhì)基質(zhì)主要呈固態(tài)， 具有脂質(zhì)納米粒的特征。 吸熱峰的移動可以證明脂質(zhì)基質(zhì)中晶格缺 陷的存在， 這種晶格缺陷可能是由于液態(tài)脂質(zhì)的 加入。

4 結(jié)論

使用熱高壓均質(zhì)法成功制備出了白藜蘆醇和 亞麻籽油復(fù)配的納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體， 該體系具有 良好的物理穩(wěn)定性、光穩(wěn)定性和緩慢釋放的特點。 DPPH 自由基清除試驗的結(jié)果證明了白藜蘆醇的 抗氧化活性和亞麻籽油對它的促進作用。 此外，脂 質(zhì)的加速氧化研究中發(fā)現(xiàn)，NLC 的固態(tài)核結(jié)構(gòu)抑 制了亞麻籽油的氧化， 并且白藜蘆醇的抗氧化作 用顯著。 本文研究的白藜蘆醇和亞麻籽油載體，在 功能食品領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用價值。