60Co-γ 射線輻照滅菌因其操作方便、滅菌效率 高、且具有常溫常壓、穿透力強(qiáng)的特點(diǎn)，多用于中 藥材原生粉或原生粉直接制成片劑或膠囊劑滅 菌。肚液散為廈門(mén)大學(xué)附屬第一醫(yī)院院內(nèi)制 劑，是廈門(mén)已故名醫(yī)周慕卿祖?zhèn)髅胤剑?由 甘 草、懷山 藥、麥 芽、雞 內(nèi) 金、灰香散等藥味組 成，用于治療消化不良、食欲不振、腸鳴腹瀉，療效顯著。

1 儀器與材料

1. 1 儀器

Waters UPLC 超高效液相色譜儀 ( 包 括 QSM 二元溶劑管理器、PDA 二極管陣列檢測(cè) 器、SM-FTN、樣品管理器、CH-A 型柱溫箱，美國(guó) Waters 公 司) ; 數(shù) 控 超 聲 波 清 洗 器 KQ-100DE 型 ( 昆山舒美超聲儀器公司) ; GTＲ16-2 高 速 離 心 機(jī) ( 北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司) ; 分析天平 ( 丹佛儀器北京有限公司) 。

1. 2 材料

甘草苷 ( 批號(hào) 111610-201106，含有量 93. 1%) 、甘 草 酸 銨 ( 批 號(hào) 111610201106110731- 201418，含有量 93. 1%) 均購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢 定研 究 院; 異 甘 草 素 ( 批 號(hào) 30518，含 有 量 ≥ 94%) 購(gòu)于上海阿拉丁生化科技股份有限公司; 甘 草藥材 ( 批號(hào) 171024) 購(gòu)于鷺燕醫(yī)藥公司 ( 內(nèi)蒙 古) ; 麥芽藥材 ( 批號(hào) 171002) 購(gòu)于鷺燕醫(yī)藥公司 ( 浙江) ; 山藥藥材 ( 批號(hào) 170913) 購(gòu)于鷺燕醫(yī)藥 公司 ( 河南) ; 灰香散 ( 批號(hào) M171004) 自制中間 品; 色譜級(jí)乙腈、甲醇 ( 德國(guó) Merck 公司) ; 磷酸 ( 上?；瘜W(xué)試劑總廠) 。 13 批未 接 受 輻 射 肚 液 散 成 品，批 號(hào) 分 別 為 170503、 170504、 170505、 170506、 170510、 170512、 170515、 171003、 171004、 171101、 171105、180401、180402，取批號(hào)為 180401 肚液 散，保存未輻射母樣，將樣品分成 2 份，分別為接 受60 Co-γ 射線輻射劑量為 4、8 kGy，每種劑量平行 4 份。

2 方法與結(jié)果

2. 1 指紋圖譜建立

2. 1. 1 色譜條件

ACQUITY UPLC BEH C18色譜 柱 ( 2. 1 mm×100 mm，1. 7 μm) ; 流動(dòng)相乙腈-水 ( 含 0. 05% 磷酸) 梯度洗脫，程序見(jiàn)表 1; 柱溫 25 ℃ ; 體積流量 0. 18 mL /min; 檢測(cè)波長(zhǎng) 237 nm; 進(jìn)樣量 1 μL。

2. 1. 2 對(duì)照品溶液制備

分別精密稱取甘草苷、 甘草酸銨、異甘草素對(duì)照品適量，用 70%甲醇配 成質(zhì)量濃度分別為 1. 41、0. 954、0. 415 mg /mL 的 貯 備 液，精 密 量 取 適 量，制 成 0. 141、0. 477、 0. 041 5 mg /mL對(duì)照品溶液。甘草酸質(zhì)量 = 甘草酸 銨質(zhì)量/1. 020 7 。

2. 1. 3 供試品溶液制備

稱取肚液散粉末 2. 4 g， 精密 稱 定，置于具塞錐形瓶中，加 入 70% 甲 醇 20 mL，精密量取，超聲 30 min，放冷，用 70%甲 醇補(bǔ)足減失質(zhì)量，離心 ( 5 000 r/min) 5 min，取 上清液過(guò) 0. 22 μm 微孔濾膜，即得。

2. 1. 4 參照峰選擇

在肚液散指紋圖譜中，甘草 酸 ( 峰號(hào) 15) 分離度好，峰面積較大，故選作參 照峰。

2. 1. 5 精密度試驗(yàn)

稱取肚液散 ( 批號(hào) 170515) 粉末 2. 4 g，精密稱定，按 “2. 1. 3”項(xiàng)下方法制 備供試品溶液，精密吸取 1 μL，在 “2. 1. 1”項(xiàng)色 譜條件下進(jìn)樣 6 次，測(cè)得各共有峰相對(duì)保留時(shí)間和 相對(duì)峰面積，其相對(duì)保留時(shí)間 ＲSD＜0. 44%，相對(duì) 峰面積 ＲSD＜2. 05%，表明儀器精密度良好。

2. 1. 6 重復(fù)性試驗(yàn)

取肚液散 ( 批號(hào) 170515) 粉 末 2. 4 g，精密稱定，平行 6 份，分別按 “2. 1. 3” 項(xiàng)下方法制備供試品溶液，精 密 吸 取 1 μL，在 “2. 1. 1”項(xiàng)色譜條件下進(jìn)樣，測(cè)得各共有峰相對(duì) 保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，其相對(duì)保留時(shí)間 ＲSD＜ 1. 58%，相對(duì)峰面積 ＲSD＜2. 61%，表明該方法重 復(fù)性良好。

3 討論

本研究先后分析了乙腈-水、甲 醇-0. 05% 磷 酸、乙腈-0. 05%磷酸、乙腈-乙酸乙酸銨緩對(duì)、乙 腈-0. 1%磷酸等多個(gè)流動(dòng)相系統(tǒng)，最終確定乙腈0. 05%磷酸分離效果較好，峰信息量較大。同時(shí)， 根據(jù) DAD 全波長(zhǎng)掃描結(jié)果，在 237 nm 波長(zhǎng)下，特 征峰響應(yīng)較高，色譜圖基線噪音較低，反映的信息 量較大，確定 237 nm 為檢測(cè)波長(zhǎng)。 22 個(gè)共有指紋峰多為未知成分，且對(duì)照品不 易獲得。但與單味藥材在相同液相條件下獲得的色 譜圖比較保留時(shí)間及紫外特征吸收光譜信息，初步 確定 22 個(gè)共有峰多來(lái)自甘草。肚液散由甘草、麥 芽、山藥、灰香散等組成，為建立更加完善的肚液 散質(zhì)量評(píng)價(jià)系統(tǒng)，下一步將補(bǔ)充肚液散氣相指紋圖 譜，從而獲得更加全面的組分信息，更好控制產(chǎn)品質(zhì)量。



 

免責(zé)聲明：文章僅供學(xué)習(xí)和交流，如涉及作品版權(quán)問(wèn)題需要我方刪除，請(qǐng)聯(lián)系我們，我們會(huì)在第一時(shí)間進(jìn)行處理。