茄根又名茄母,為茄科茄屬植物茄( Solamum melongena L. ) 的干燥根。茄根作為藥用,早已記載 于《開寶本草》、《日用本草》等醫(yī)書中。其味甘 微苦,具有止痛、祛風(fēng)利濕、清熱止血等功效。民間 多用于治療牙疼、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、凍瘡、腳氣及便血 等病癥。茄在我國廣泛分布和種植,一般茄子收 獲完畢,茄根便當(dāng)柴燒,對(duì)藥用資源是一種極大的浪 費(fèi)。
1 儀器與試劑
1. 1 儀器
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( 型號(hào): N-1300V 型,生產(chǎn)廠家: 東京理化器械株式會(huì)社) ; 循環(huán)水式多用真空泵( 型號(hào): SHZ-DⅢ,生產(chǎn)廠家: 上海科興儀器有限公司) ; 電子 分析天平( 型號(hào): XS205DU 型,生產(chǎn)廠家: 上海梅特勒-托利多有限公司) ; 紫外可見分光光度計(jì)( 型號(hào): Gold S54,生產(chǎn)廠家: 上海棱光技術(shù)有限公司) ; 數(shù)控超聲波清洗器( 型號(hào): KQ5200DE 型,生產(chǎn)廠家: 昆山舒美超聲儀器有限公司) ; 臺(tái)式電熱干燥箱( 型號(hào): 202- 2AB 型,生產(chǎn)廠家: 天津市泰斯特儀器有限公司) ; 水浴鍋( 型號(hào): HH. S11-Ni2 型,生產(chǎn)廠家: 北京三二 八科學(xué)儀器有限公司) ; 臺(tái)式低速離心機(jī)( 型號(hào): TD4 型,生產(chǎn)廠家: 常州金勝儀器制造有限公司) ; 純水儀( 生產(chǎn)廠家: MILLIPORE) 。
1. 2 試劑
茄根采自山東省泰安市泰山區(qū)上高街道辦事處 上高村,由山東省泰安市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心中 藥科的刁興斌老師鑒定為茄科( Solanaceae) 茄屬植 物( Solanum L. ) 茄的干燥根莖部位; 水: 超純水( 自 制) ; 石油醚、無水乙醇、濃硫酸、正丁醇、葡萄糖、苯 酚、氯仿、丙酮等均為分析純。
2 方法與結(jié)果
樣品處理→脫脂→浸提→抽濾除渣→減壓濃縮 →離心→乙醇沉淀多糖→靜止離心→粗多糖→復(fù)溶 →脫蛋白→醇沉→干燥→精制多糖。脫脂: 稱取藥材 5. 0 g,置于 250 mL 具塞錐形瓶 中,加入 50 mL 石油醚,密塞后,振搖,超聲( 40℃, 頻率 40 kHz) 提取 30 min,脫去其表面脂類物質(zhì),抽 濾,晾干,重復(fù)脫脂 1 次。 浸提: 脫脂晾干后試樣,以 1∶ 20 的料液比加入 蒸餾水,在 40℃水浴中超聲浸提 30 min,過濾后,在 相同條件下重復(fù)提取 1 次。 抽濾除渣: 將 2 次提取液合并,減壓抽濾。 減壓濃縮: 利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮濾液,約至 20 mL,冷卻至室溫。 離心和 醇 沉: 將 濃 縮 液 離 心 5 min ( 5000 r/ min) ,棄去沉淀后,緩慢加入無水乙醇( 約 3 倍量) , 不斷用玻璃棒攪拌,使多糖充分析出。 靜置離心: 將上述溶液靜置 1 d 后,在離心機(jī)上 離心得粗多糖沉淀。 復(fù)溶和脫蛋白: 粗多糖復(fù)溶,利用 Sevage 試劑 除蛋白,連續(xù)操作到脫除蛋白質(zhì)完全。 醇沉: 在除去蛋白后的溶液中加入無水乙醇( 3 倍量) 沉淀,依次用石油醚、丙酮、乙醇反復(fù)洗滌,離心,干燥,得精制多糖。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制: 分別精密吸取 0. 0、0. 8、1. 2、 1. 6、3. 2 mL 的 40 μg /mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液,置于 10 mL 具塞刻度試管中,分別在各試管中加入超純 水至體積為 2. 0 mL,空白試管中加入 2. 0 mL 超純 水作對(duì)照,各管分別加入 6% 苯酚溶液 1. 0 mL,搖 勻,滴加濃硫酸 5. 0 mL,振搖,放置 5 min,置沸水浴 中加熱 25 min,迅速冷卻,至室溫,在 490 nm 波長處 測量吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3 結(jié) 論
本實(shí)驗(yàn)采用超聲波輔助法對(duì)茄根中的多糖進(jìn)行 提取,用苯酚-硫酸法測其含量。在苯酚-硫酸法的 條件下,測得茄根多糖含量平均為 4. 5% 。該實(shí)驗(yàn) 的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好,多糖含量測定結(jié)果穩(wěn)定, 重現(xiàn)性好,回收率高,說明苯酚-硫酸法可以用于測 定茄根中多糖含量,具有一定的推廣和參考價(jià)值,同 時(shí)也為茄根藥材的質(zhì)量控制提供了參考依據(jù)。