1　材料與方法 

1.1　儀器 

美國(guó)Finnigan公司TSQ Quantum Discovery MAX 型液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（LC-MS/MS，美國(guó)Finnigan公司）；Eppendorf 5427 R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（Eppendorf中 國(guó)有限公司）；XW-80A 旋渦混合器（上海青浦滬西儀 器廠）；BS110S 型電子天平 [ 賽多利斯科學(xué)儀器（北 京）有限公司]；昆山舒美KQ-500DE型數(shù)控超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）。 

1.2　藥物與試劑 

芍藥苷（純度：96.4%，批號(hào)：110736-201438）購(gòu) 自中國(guó)食品藥品檢定研究院；黃芩苷（純度：93.3%， 批號(hào)：110715-201318）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究 院；黃芪甲苷（內(nèi)標(biāo)，純度：93.0%，批號(hào)：110781- 201515）購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；芍藥、黃 芩、檳榔、厚樸、草果、知母、甘草藥材購(gòu)自湖北蘄 州中藥材市場(chǎng)；色譜純甲醇和乙腈購(gòu)自美國(guó) Fisher Scientific公司；水為娃哈哈飲用純凈水（杭州娃哈哈 集團(tuán)有限公司）。 

1.3　動(dòng)物 

6 只雄性 SD 大鼠，體質(zhì)量（220±20）g，購(gòu)自 北京維通利華動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)： SCXK（京）2014 – 0016。動(dòng)物飼養(yǎng)于溫度控制在 （25±2）℃、濕度控制在40% – 60%的環(huán)境中，每天 交替進(jìn)行12 h光照，12 h黑暗處理。

2　結(jié)果

采用大鼠空白血漿樣品、大鼠空白血 漿加入被測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液和內(nèi)標(biāo)的樣品、大鼠給藥1 h后 血漿樣品進(jìn)行處理進(jìn)樣，得到大鼠血漿中被測(cè)物和內(nèi) 標(biāo)的典型色譜圖。顯示血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不 干擾被測(cè)物和內(nèi)標(biāo)的測(cè)定，且被測(cè)物和內(nèi)標(biāo)之間的分 離度良好。芍藥苷、黃芩苷和內(nèi)標(biāo)的出峰時(shí)間分別為 1.91 min、3.08 min、3.69 min，出峰位置無(wú)干擾，方法 的專屬性良好。采用加權(quán)最小二乘法計(jì) 算標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，以被測(cè)物與內(nèi)標(biāo)黃芪甲苷的峰面積 比值為Y，以被測(cè)物的質(zhì)量濃度為X，得到芍藥苷的回 歸方程為Y = 5.148×10-4 X – 2.6148×10-3，權(quán)重因子 W = 1/X2 ，相關(guān)系數(shù)r 2 = 0.995 1；黃芩苷的回歸方程為 Y = 6.613×10-4 X + 1.863 2×10-3，權(quán)重因子W = 1/X2 ， 相關(guān)系數(shù)r 2 = 0.996 5。芍藥苷和黃芩苷的定量下限均為5 ng·mL-1，連續(xù)進(jìn)樣6次，被測(cè)物準(zhǔn)確度在80% – 120%范圍內(nèi)，精密度（RSD）小于20%，參照《藥物非 臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，該結(jié)果符合生 物樣品測(cè)試要求。

3　討論

采用高效液相色譜法探討達(dá)原飲中芍藥苷、黃芩苷等有效成分含量的研究已有報(bào)道，考慮到高 效液相色譜法的靈敏度較低，且達(dá)原飲中各有效成分 的含量較低，故本研究采用LC-MS/MS技術(shù)研究達(dá)原 飲中兩種成分在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，建立 了大鼠血漿中芍藥苷和黃芩苷濃度同時(shí)測(cè)定的方法， 并進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證。兼顧本實(shí)驗(yàn)室液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) 的儀器性能、達(dá)原飲中芍藥苷和黃芩苷的含量及給 藥劑量，本研究將兩種化合物的線性范圍設(shè)定為5 ~ 2000 ng·mL-1可以滿足本藥代動(dòng)力學(xué)研究的需要。

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