在“回歸自然”綠色浪潮的推動(dòng)下,中藥在畜禽業(yè)中 的應(yīng)用越來越普遍。中藥可以增強(qiáng)畜禽免疫力和生產(chǎn)性 能已得到廣泛證實(shí)。但目前,該方面的產(chǎn)品大多為散 劑,且多以飼料添加劑的形式上市銷售。中藥成分復(fù) 雜,再加上制成散劑后各中藥成分存在相互影響等復(fù)雜 因素,增加了鑒別的難度。制成口服液后,經(jīng)煎煮一些 成分之間相互作用,導(dǎo)致成分更 為 復(fù) 雜 ,鑒 別 的 難 度 進(jìn) 一步升級(jí)。
1 試劑、儀器
1.1 試劑與藥物
芪楂口服液樣品,芪楂口服液黃芪、大黃、蒼術(shù)陰性樣品, 由湖南圣雅凱生物科技有限公司生產(chǎn)制備;黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品 (中國食品藥品檢定研究院,批號(hào):110781-201610);大黃酚標(biāo) 準(zhǔn)品(中國食品藥品檢定研究院,批號(hào):110796-201701);大黃 酸標(biāo)準(zhǔn)品(中國食品藥品檢定研究院,批號(hào):110757-201706); 黃芪(蒙古黃芪)對(duì)照藥材(中國食品藥品檢定研究院,批號(hào):120974-2016011);蒼術(shù)(茅蒼術(shù))對(duì)照藥材(中國食品藥品檢 定研究院,批號(hào):120932-201706);正丁醇、氨水、甲醇、三氯 甲烷、乙醚、乙酸乙脂、石油醚(30~60 ℃)甲酸乙酯、甲酸、石 油醚(60~90 ℃)、硫酸、乙醇、對(duì)二甲氨基苯甲醛等試劑均 為分析純,均購自長沙市裕豐化玻器械有限公司,水為純 化水(自制),所用試液和顯色劑均按《中華人民共和國獸藥 典》2015 年版附錄規(guī)定配制。
1.2 儀器設(shè)備
雙量程電子天平(日本島津公司,AUW220D);點(diǎn)樣毛 細(xì)管、薄層色譜展開缸(雙槽 100×00;華西醫(yī)科大學(xué)儀器 廠);硅膠 G 薄層色譜板、硅膠 H 薄層色譜板 100×100(青 島勝海精細(xì)硅膠化工有限公司);三用紫外分析儀(上海 電光儀器有限公司,ZF-I 型);超聲儀 (昆山舒美超聲儀器有限公司,KQ-5200V);電熱鼓風(fēng)干燥箱(北京永光明 醫(yī) 療 儀 器有限公司,101 型);ZYR1-3t 多功能提取系統(tǒng), WZ2-2000L 雙效節(jié)能真空濃縮系統(tǒng)、3 000 L 藥液儲(chǔ)罐、 雙聯(lián)過濾器、2 000 L 醇沉罐(均購自衡陽中-提取設(shè)備有 限公司);2 000 L 醇沉液儲(chǔ)罐 (浙江溫州森博輕工機(jī)械有 限公司);GQ150 型管式高速離心機(jī)(遼陽鑫鴻達(dá)離心機(jī)有 限公司)。
2 方法與結(jié)果
取芪楂口服液 25 mL,用水飽和 的正丁醇提取 4 次,每次 40 mL,合并正丁醇液;氨試液洗 滌 2 次,每次 25 mL;棄去氨試液,正丁醇液蒸干,殘?jiān)?甲醇 5 mL 使溶解,作為供試品溶液。按處方取除黃芪的其余藥 材,按制備工藝制成缺黃芪的陰性樣品,按照上邊的方法制成陰性樣品對(duì)照溶液。取黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品 0.010 08 g,置 50 mL 容量瓶中,加甲醇制成含 0.2 mg/mL 的溶液,作為黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn),吸取供試品 溶液、陰性樣品溶液、黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液及黃芪對(duì)照藥 材溶液各 5 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠 G 薄層板上,以三氯甲 烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾 干,噴以 10%硫酸乙醇溶液,在 105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清 晰。照薄層色譜法試驗(yàn),在與 標(biāo)準(zhǔn)品溶液相應(yīng)的位置處,日光下顯示相同的棕褐色的斑 點(diǎn);紫外燈(365 nm)下,顯示相同的橙黃色的熒光斑點(diǎn), 陰性樣品無干擾,符合農(nóng)業(yè)部下發(fā)新獸藥芪楂口服液質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)。提示芪楂口服液大生產(chǎn)與原研結(jié)果一致,工藝穩(wěn)定, 新建中藥口服液提取工藝設(shè)備可滿足提取黃芪的技術(shù)要求。
3 討論
為芪楂口服液研究成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目,中藥口服 液擴(kuò)產(chǎn)后應(yīng)用新設(shè)備生產(chǎn)芪楂口服液,產(chǎn)品中黃芪、大黃、 蒼術(shù)藥材鑒定符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部下發(fā)新獸藥芪楂口服液注 冊(cè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為實(shí)施芪楂口服液成果轉(zhuǎn)化,驗(yàn)證新設(shè)備滿 足產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供藥材鑒別依據(jù),含量測(cè)定有待進(jìn)一步 驗(yàn)證。芪楂口服液療效與產(chǎn)品質(zhì)量密切相關(guān),芪楂口服液 由黃芪、山楂、麥芽、大黃、大青葉、蒼術(shù)組成,研究成果轉(zhuǎn) 化過程中,藥材質(zhì)量是保證產(chǎn)品質(zhì)量的先決條件,如茅蒼術(shù)揮發(fā)油的主要成分為蒼術(shù)酮、蒼術(shù)素、β-桉葉醇和茅術(shù) 醇等?,F(xiàn)代研究表明,茅蒼術(shù)揮發(fā)油的活性物質(zhì)有調(diào)節(jié)胃 腸運(yùn)動(dòng)、抗胃潰瘍、降血糖、保護(hù)肝臟和抗菌等藥理作用, 茅蒼術(shù)質(zhì)量與產(chǎn)地有關(guān)。道地藥材茅蒼術(shù)主產(chǎn)于江蘇省鎮(zhèn) 江市茅山山脈一帶,且集散于江蘇省南京市,因此,其別稱 南蒼術(shù)、茅術(shù)、京蒼術(shù)。由于其優(yōu)良種質(zhì)資源的瀕危、過度 開墾、生存環(huán)境遭到破壞,茅蒼術(shù)野生資源日益枯竭,該 地區(qū)茅蒼術(shù)已滿足不了市場(chǎng)需求。