蓮白片是由穿心蓮、白花蛇舌草、石上柏等 5 味藥 材制成的薄膜衣片，具有抗癌、散結(jié)、止痛、止血等作用， 臨床常用于絨毛膜上皮癌、惡性葡萄胎、肺癌、鼻炎癌 等，與放射治療或化學(xué)治療配合使用可縮短療程，加快 腫瘤消退。穿心蓮為方中君藥，具有清熱解毒、涼血消腫 功效，主要成分為內(nèi)酯類、黃酮類和甾醇類等。穿心蓮內(nèi) 酯具有顯著的抗炎消腫作用，在穿心蓮定量分析成分中 占有比率較高，可作為本品含量測定的檢測指標(biāo)。

KQ400KDE 型臺式高功率數(shù)控清洗器 ( 功 率 為 40 ～ 100 W，工作頻率為 40 kHz，昆山舒美超聲儀器有限 公司) ; DHG － 9625A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱( 上海一恒科技有限公司) ; 全自動薄層鋪板儀( 北京思普特科技有限公司) ; LB － 2D 型智能崩解時限測定儀( 上海黃海藥檢儀器銷售有限公司) ; XP205DR 型電子天平( 十萬分之 一 ，Mettler Toledo 公 司 ) ; LC － 20AD 型高效液相泵， SPD － 20A 型紫外檢測器( 日本島津公司) ，美國奧泰 SS420X 工作站; 市售硅膠 G 薄層板( 青島海洋化工廠) ; 自 制硅膠 G 薄層板( 取硅膠 G 適量，按 1 份固定相和 3 份 含 0． 3% 羧甲基纖維素鈉的水溶液進(jìn)行混勻，用薄層鋪 板器制成 10 cm × 20 cm、厚度 0． 4 mm 的硅膠 G 薄層板，晾干，110 ℃條件下加熱 30 min，置干燥器存放) 。

乙醇、乙酸乙酯、正己烷、三氯甲烷、冰醋酸、磷鉬 酸、三氯化鋁、醋酸鈉等(分析純，成都市方舟化學(xué)試劑 廠); 甲醇( 色譜純，F(xiàn)isher 公司) ; 純凈水( 娃哈哈集團(tuán)有 限公司) ; 齊墩果酸對照品( 批號為 110709 － 201206) ， 蘆丁對照品( 批號為 100080 － 201610) ，穿心蓮內(nèi)酯對 照品( 供鑒別用，批號為 110797 － 201609) ，白花蛇舌草 對照藥材( 供鑒別用，批號為 121183 － 201605) ，均購于 中國食品藥品檢定研究院; 蓮白片( 實(shí)驗(yàn)室自制，批號分 別為 20170103，20170104，20170105) 。

取本品適量，去薄膜衣，研細(xì)，取 2 g，精密稱定，加 甲醇 20 mL，超聲處理 40 min，濾過，濾液濃縮至 1 mL， 作為供試品溶液。取齊墩果酸對照品適量，加甲醇溶解， 制成每 1 mL 含 0． 5 mg 的對照品溶液; 另取白花蛇舌草 對照藥材 1 g，照供試品溶液制備方法同法制備對照藥 材溶液。取蓮白片處方中除白花蛇舌草外的藥材，通過 相應(yīng)制備工藝制成陰性對照品，取約 2 g，按供試品溶液 制備方法制成陰性對照品溶液。參照 2015 年版《中國藥 典( 一部) 》通則 0502 項(xiàng)下方法，精密吸取對照品溶液 5 μL、供試品溶液及陰性對照品溶液各 10 μL，分別點(diǎn) 于同一硅膠 G 薄層板上，以正己烷 － 三氯甲烷 － 甲醇 ( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 為展開劑，上行展開 15 min，取出，晾 干，噴 10% 磷鉬酸乙醇試液，在 105 ℃ 下加熱至斑點(diǎn)顯 色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液及對照藥 材溶液相同位置上顯相同顏色斑點(diǎn)，Rf 值 0． 3 ～ 0． 7，斑 點(diǎn)分離度良好，陰性對照無干擾。取 105 ℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品 11． 67 mg， 精密稱定，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度， 搖勻，即得對照品溶液( 每 1 mL 中含蘆丁 1． 167 mg) 。 取蓮白片適量，去包衣，取約 3 g，精密稱定，置索氏提取 器中，加三氯甲烷 70 mL，回流 3 h 脫脂，濾過，棄去三氯 甲烷，殘?jiān)鼡]干，加甲醇 70 mL，再加熱回流 2 h，濾過， 濾液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至 25 mL 容量瓶中， 加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。稱取 1． 5 g 無水 醋酸 鈉，加 入 50 mL 水使 溶解 ，用冰醋 酸調(diào) 節(jié) pH 至 4． 5 ± 0． 1，得醋酸 － 醋酸鈉緩沖液( pH = 4． 5 ± 0． 1) ，備 用。稱取 0． 68 g 三氯化鋁，加入 50 mL 乙醇使溶解，得 三氯化鋁溶液 0． 102 mol / L( 0． 1 mol / L) ，備用。取 穿 心 蓮 內(nèi) 酯 對 照 品 11． 62 mg，精 密 稱 定 ，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得質(zhì)量 濃度為 1． 162 g / L 的對照品貯備液; 精密量取上述貯備 液 1 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得 質(zhì)量濃度為 0． 116 2 g / L 的對照品溶液; 精密量取對照 品溶液 5 mL，置 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度， 搖勻，得質(zhì)量濃度為 58． 1 μg / mL 的對照品溶液。

點(diǎn)樣量選擇時，吸取對照品溶液、供試品溶液各 2， 5，10，20 μL，點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G 薄層板上，依法展開，按斑點(diǎn)清晰度和分離度選擇，結(jié) 果最佳點(diǎn)樣量為供試品溶液 10 μL、對照品溶液 5 μL。 展開劑選擇時，分別以乙酸乙酯 － 甲醇 － 水( 8 ∶ 1 ∶ 1， V / V / V) 、三氯甲烷 － 乙醚( 5 ∶ l) 、甲苯 － 丙酮 － 乙 酸( 10 ∶ 2 ∶ 0． 2，V / V / V)  和正己烷 － 三氯甲烷 － 甲 醇( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 為展開劑展開并顯色。結(jié)果采用前 3 種展開劑時特征斑點(diǎn)出現(xiàn)了分離度不好、拖尾嚴(yán)重、 Rf 值過高的情況; 而最后 1 種展開劑的斑點(diǎn)分離度較 好，斑點(diǎn)顏色清晰，Rf 值適中。故以正己烷 － 三氯甲烷 － 甲 醇( 5 ∶ 5 ∶ 1，V / V / V) 為展開劑。比色方法: 分別采用硝酸鋁顯色法和三氯化鋁 顯色法對蓮白片中總黃酮進(jìn)行測定。使用硝酸鋁顯 色法時，蘆丁對照品溶液于 500 nm 波長處有最大吸收， 而供試品溶液于 500 nm 波長處的吸收較弱，說明蓮白 片用此方法測定的專屬性不強(qiáng)，有一定局限性。而采用 三氯化鋁顯色法的專屬性較強(qiáng)，在 415 nm 波長處的干 擾小，適合測定蓮白片中的總黃酮。另外，還考察過顯色 時間，從加入顯色劑開始，每隔 5 min 測 1 次吸光度，結(jié) 果在加入顯色劑后 25 ～ 35 min 時，吸光度值變化緩慢， 無顯著差異，故確定最后的顯色時間為 30 min; 三氯化 鋁的用量，分別加入了 0． 1 mol / L 三氯化鋁溶液 0． 5， 1． 0，1． 5 mL，同法制成供試品溶液，結(jié)果隨著顯色劑用 量的增大，吸光度先增大后縮小，用量在 1． 0 mL 時吸光度最大。



 

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