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不同濃度乙醇提取丹參中的探討

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-09-05 10:48【

通過對丹參水溶性成分和脂溶性成分進(jìn)行測定來評價(jià)丹參及其制劑質(zhì)量多有報(bào)道,然而大多局限于以丹酚酸 B 和丹參酮ⅡA為指標(biāo)性成分,且由于丹酚酸類化合物的不穩(wěn)定性,水溶性成分與脂溶性成分性質(zhì)差異太大,很少有同時(shí)測定多種水溶性和脂溶性成分的報(bào)道。同事針對相同適應(yīng)癥的中藥制劑研究很多,提取工藝也多種多樣,但迄今稍未見溶劑極性差異對丹參成分溶出影響的報(bào)道。



1 儀器與試藥

Agilent1200型高效液相色譜儀,美國安捷倫公司;Agilent Extend-C18 色譜柱,KQ-300型超聲波清洗器,昆山舒美超聲儀器有限公司;



2 方法和結(jié)果

色譜條件 色譜柱:Agi );流動相: 0~5 min,1 80 min,20% A);檢測波長 mL/min;進(jìn)樣 A.混合對照品;B 酸;4.阿魏酸;5 9.丹酚酸 C;精密稱取丹參 香酸、紫草酸 參酮、丹參酮 成濃度分別為 、7.864、 供試品溶液制 取丹參粉末 形瓶中,精密 10 20 3 1 2 3 4 10 20 30 2 3 4 Se 1711011)購 科植物丹參 S 乙腈、磷酸為 純凈水(杭州 酒精(北京鴻 ilent Extend-C 乙腈(A)- 0%A;5~25 %A→70%A; 長:280 nm; 樣量:10 μL。 A B B.80%醇提液供試 .迷迭香酸;6.紫草 0.隱丹參酮;11.丹 丹參中 12 種指標(biāo) 溶液制備 參素鈉、原兒 酸、丹酚酸 B 酮Ⅰ、丹參酮 為 5.649、0.74 39、1.010、2.0 液,置于 4 ℃ 制備 1 g(過 65 密加入不同濃 30 40 50 5 6 7 8 9 40 50 7 5 6 8 9 ep.2019 Vo 購自河北百草 Salvia miltior 為色譜純(美 州娃哈哈集團(tuán) 鴻志偉達(dá)工貿(mào) C18(250 mm -0.1%磷酸( 5 min,10%A 80~90 mi ;柱溫:25 。色譜圖見圖 試品;1.丹參素鈉; 草酸;7.丹酚酸 B 丹參酮Ⅰ;12.丹參 標(biāo)成分 HPLC 圖 兒茶醛、咖啡酸 B、丹酚酸 A 酮ⅡA 對照品 45、0.798、0 099、0.886、5 ℃冰箱避光保 目篩),精密 濃度乙醇(0% 60 70 8 101 60 70 8 101 l.26 No.9 草康神藥業(yè)有 rrhiza Bge.的 美國 Fisher 公 團(tuán)有限公司), 貿(mào)有限公司)。 m×4.6 mm, B),梯度洗 A→20%A; in,70%A→ ℃;流速。取已知含量的丹參粉末 6 份,每份約 0.025 g,置 2 mL 量瓶中,精密加入含丹參素鈉 17.09 μg/mL、原 兒茶醛 1.44 μg/mL、咖啡酸 2.55 μg/mL、阿魏酸 0.64 μg/mL、迷迭香酸 44.23 μg/mL、紫草酸 62.79 μg/mL、 丹酚酸 B 571.35 μg/mL、丹酚酸 A 19.91 μg/mL、丹酚 酸 C 18.19 μg/mL、隱丹參酮 21.83 μg/mL、丹參酮Ⅰ 12.64 μg/mL、丹參酮ⅡA 29.82 μg/mL 的混合對照品 溶液 1 mL,按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試溶液,按“2.1” 項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行分析,計(jì)算加樣回收率及 RSD,結(jié) 果表明本方法回收率良好。



3 討論

昆山舒美以 12 種化合物的含量作為考察指標(biāo),采 用單因素法分別考察了不同提取方式(加熱回流法和 超聲法)、不同提取溶劑體積(6、10、20、40 倍)、 不同提取次數(shù)(1、2、3 次)和不同提取時(shí)間(45、 60、90 min),最終確定丹參樣品的最佳提取方法為用 40 倍溶劑超聲提取 1 次,每次 60 min,此條件下目標(biāo) 成分提取較為完全,提取效率高、重復(fù)性較好。 考慮到待測成分復(fù)雜,化學(xué)屬性相差較大,為確 保在同一檢測條件下對所有 12 種成分都有較好的分 離效果,本研究對不同種類、不同廠家的色譜柱進(jìn)行 考察,同時(shí)對流動相、柱溫和流速進(jìn)行優(yōu)化,最終確 定采用 Agilent Extend-C18 色譜柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脫, 柱溫 25 ℃,在該條件下所得色譜圖的分離效果、峰形等均較好。



 


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