鼠曲草為菊科植物鼠曲草 Gnaphlium affine D. Don 的全草，具有祛痰、止咳、平喘、祛風(fēng)濕等功 效，主要活性成分有黃酮類(lèi)、二萜類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi) 等，鼠曲草有降血壓、降尿酸等藥理作用，且藥食 兩用，具有較大的研究?jī)r(jià)值和開(kāi)發(fā)潛力。鼠曲草的 多成分、多功效的作用特點(diǎn)，單一成分難以反應(yīng)其 內(nèi)在質(zhì)量。因此，應(yīng)選擇多成分、多指標(biāo)的測(cè)定方 法，對(duì)與其功效相關(guān)的化學(xué)成分進(jìn)行全面綜合的評(píng) 價(jià)。2006 年，王智民提出了一種新的評(píng)價(jià)中藥內(nèi)在 質(zhì) 量 模 式 ， 即 一 測(cè) 多 評(píng) 法（quantitative analysis of multi-components by single marker，QAMS）。QAMS 以樣品中某一成分為內(nèi)參物，建立該成分與其他成 分間的相對(duì)校正因子，通過(guò)相對(duì)校正因子計(jì)算其他 成分的含量。該方法具有快速、簡(jiǎn)便并能同時(shí)實(shí)現(xiàn) 多成分同步測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)采用 QAMS 技 術(shù)，以綠原酸為內(nèi)參物，測(cè)定鼠曲草中的咖啡酸、 異毛蕊花糖苷和異澤蘭黃素的相對(duì)校正因子，建立 鼠曲草藥材的 QAMS 方法，以期為鼠曲草質(zhì)量控制 提供新的評(píng)價(jià)模式。

Shimadzu LC-2010AHT 高效液相色譜系統(tǒng) （日本島津公司）；Agilent 1220 液相色譜儀系統(tǒng)（美 國(guó)安捷倫公司）；色譜柱：Agilent HC-C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm），UItisiITMAQ-C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm），Inertsil ODS-3（4.6 mm× 250 mm，5 μm）； BS210S 萬(wàn)分之一分析天平（德國(guó) Sartorious 公司）； KQ-250D 型數(shù)控超聲儀（昆山市超聲儀器有限公司）。

鼠曲草采集于漢中連城山及購(gòu)買(mǎi)于江西、福建、云南，經(jīng)西安醫(yī)學(xué)院張寒副教授鑒定 為菊科鼠曲草屬鼠曲草 Gnaphlium affine D. Don 的全 草；綠原酸（成都艾科達(dá)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)： MUST-12031401，純度≥98%）；咖啡酸（西安開(kāi)來(lái)生 物工程有限公司；批號(hào)：K120711，純度≥98%）；異 毛蕊花糖苷和異澤蘭黃素（成都埃法生物科技有限公 司，批號(hào)：AF8032807，AF7112223，純度≥98%）。 乙腈、甲醇均為色譜純；其余試劑均為分析純。水 為娃哈哈飲用純凈水。

色譜柱：Agilent HC -C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；檢測(cè)波長(zhǎng) 360 nm；柱溫 27 ℃；體 積流量 1 mL·min- 1 ，進(jìn)樣量 10 μL；流動(dòng)相為乙腈 （A）-0.2%磷酸水（B），梯度洗脫（0～8 min，6%～ 15% A； 8～30 min， 15% ～20% A； 30～33 min， 20%～30% A；33～60 min，30%～40% A）。在上述 色譜條件下，各組分分離度良好，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品色 。

分別取綠原酸、異毛 蕊花糖苷和異澤蘭黃素對(duì)照品 5 mg，咖啡酸對(duì)照品 10 mg，精密稱(chēng)定，分別置于 10 mL 容量瓶中，加甲 醇溶解，定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為綠原酸 0.52 mg·L- 1 、咖啡酸 1.06 mg·L- 1 、異毛蕊花糖苷 0.53 mg·L-1 和異澤蘭黃素 0.50 mg·L-1 。分別精密量 取 1 mL 上述各對(duì)照品溶液置于 10 mL 容量瓶，加甲醇 定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為綠原酸 0.052 mg·L-1 、 咖啡酸 0.106 mg·L-1 、異毛蕊花糖苷 0.053 mg·L-1 和異澤蘭黃素 0.050 mg·L-1 的混合對(duì)照品溶液。

鼠曲草藥材干燥粉碎后取 粉末 0.1 g，精密稱(chēng)定，置 25 mL 容量瓶中，加入 20 mL 的甲醇超聲處理 15 min 后，取出放涼后定容 至刻度，取上清液過(guò) 0.45 μm 濾膜，即得。 2.2.3 線性關(guān)系考察 精密吸取上述混合對(duì)照品溶液 0.4、1、2、3、4 mL 分別放置在 10 mL 的容量瓶 中，用甲醇定容后分別進(jìn)樣，以進(jìn)樣量對(duì)峰面積積 分值進(jìn)行回歸處理，得到綠原酸、咖啡酸、異毛蕊 花糖苷和異澤蘭黃素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3 討論

鼠曲草含黃酮類(lèi)、二萜類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)等活性成 分，其中綠原酸具有抗氧化、抗菌、抗癌、降血 脂、降血糖等藥理作用；咖啡酸具有抗氧化、升血 小板、抗血小板凝集、抗氧化、抗腫瘤和腦保護(hù)作 用[6] ；異毛蕊花糖苷有抗氧化、抗溶血、抑制血管緊 張素轉(zhuǎn)化酶及抗高血壓的活性 ；異澤蘭黃素有抗胃 腫瘤、抗氧化的作用。因此本研究選擇這 4 種化合 物作為鼠曲草質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)。綠原酸在鼠曲草中 化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定且含量相對(duì)較高，對(duì)照品價(jià)廉易 得，其提取分離純化工藝相對(duì)成熟，故選用其做為 內(nèi)參物。本研究分別考察了不同的色譜柱及色譜儀 對(duì)相對(duì)校正因子、相對(duì)保留時(shí)間的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表明，咖啡酸、異毛蕊花糖苷、異澤蘭黃素的相對(duì) 校正因子的重現(xiàn)性較好。同時(shí)采用外標(biāo)法測(cè)定了鼠 曲草中咖啡酸、異毛蕊花糖苷、異澤蘭黃素的含 量，比較外標(biāo)法和一測(cè)多評(píng)法所得含量的結(jié)果，發(fā) 現(xiàn)兩種方法得出的結(jié)果無(wú)顯著性差異。說(shuō)明本實(shí)驗(yàn) 計(jì)算得到的相對(duì)校正因子可以作為一個(gè)穩(wěn)定的參數(shù) 運(yùn)用于鼠曲草各成分的含量計(jì)算。