附子為毛茛科植物烏頭 Aconitum carmichaelii Debx. 的子根的加工品 。在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中應(yīng)用歷 史悠久，被稱為“回陽救逆第一品”?！吨腥A人民共和 國藥典》2015 年版一部中附子以苯甲酰新烏頭原堿 （C31H43NO10）、苯甲酰烏頭原堿（C32H45NO10）和苯甲酰 次烏頭原堿（C31H43NO9）這 3 個單酯型生物堿的總量 作為質(zhì)量控制指標，含量的高低可以反映附子的內(nèi)在質(zhì) 量。附子不同的性狀中，黑順片為外皮黑褐色、切面暗 黃色，白附片為黃白色。那么，這種基于有效成分含量 的質(zhì)量評價與傳統(tǒng)的外觀色澤之間是否具有相關(guān)性，或 者說，能否采用色澤的測定進行附子質(zhì)量的評價，起到 更加便捷、快速、經(jīng)濟的效果，是人們關(guān)心的問題。

NH310 型 高 品 質(zhì) 便 攜 式 電 腦 色 差 儀［光 源： D65（代表自然日光，6504 K），CIE（國際照明委員 會）認可，深圳市三恩馳科技有限公司］；DFT-50A 型手提式高速粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）； LC-20AT 型 高 效 液 相 色 譜 儀，SPD-M20A 型二極 管陣列檢測器（島津公司）；電子分析天平（XS105 DualRange-0.000 01 g，Ohaus CP224C-0.000 1 g）； KQ-100E 型超聲波清洗器（100 W，昆山市超聲儀器有限公司）；DHG-9063A 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；RV10DS77 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 （Ika 儀器設(shè)備有限公司）。

色差儀利用的 CIE LAB 色度空間為 1976 年 CIE 推薦的均勻顏色空間，1987 年我國發(fā)布 GB7921-87， 將 LAB 空間作為國家標準。CIE LAB 是利用△L、 △a、△b 3 個坐標軸，指示顏色在幾何空間中的位 置 ?！鱈 表示明度，數(shù)值越大越感覺白，越小越 感覺黑；△a 表示紅色到綠色，數(shù)值越大越感覺紅，越 小越感覺綠；△b 表示從黃色到藍色，數(shù)值越大越感 覺黃，越小越感覺藍。 首先進行黑白校正，然后以白色 A 4 打印紙作 為標準測定 L* 標、a* 標、b* 標，再取附子樣品粉末（過 3 號篩）約 3 g 置于樣品皿中，測定 L* 樣、a* 樣、b* 樣， 計算△L=L* 樣 -L* 標，△a=a* 樣 -a* 標，△b=b* 樣 -b* 標， △E=（△L2 + △a2 + △b 2 ）1/2，結(jié)果見表 2。 2.2 3 種單酯型生物堿的含量測定 2.2.1　 色 譜 條 件　 采 用 Diamonsil Plus C18 色譜柱 （150 mm×4.6 mm，5 μm），流動相 A 為乙腈 - 四氫呋 喃（25 ∶ 15），流動相 B 為每 1 000 mL 加冰醋酸 0.5 mL 的 0.1 mol·L-1 醋酸銨溶液，梯度洗脫（0~48 min， 12%A → 22%A；48~50 min，22%A → 35%A），流 速 1.0 mL·min-1，檢測波長 235 nm，柱溫 30 ℃，進樣量 10 μL。

在 D65 光源下色度值△L 介 于 -34.38~-14.76，平 均 值 為 -23.06；△a 介 于 2.54~5.22，平 均 值 為 3.43；△b 介 于 10.94~16.34， 平均值為 12.81；△E 介 于 20.13~37.05，平 均 值 為 26.80。應(yīng)用 SPSS 分析軟件。L 與苯甲酰新烏頭 原堿、苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿的含量及 3 個單酯型生物堿的總含量呈負相關(guān)，與 5-HMF 的 含量呈正相關(guān)；△a 與苯甲酰新烏頭原堿及 5-HMF 的含量呈負相關(guān)，與苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭 原堿及 3 個單酯型生物堿的總含量呈正相關(guān)；△b 與 苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿和 5-HMF 的 含量、3 個單酯型生物堿的總含量均呈負相關(guān)，與 苯甲酰次烏頭原堿的含量呈正相關(guān)；△E 與苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿的含量呈顯著正相關(guān) （P<0.05），與苯甲酰次烏頭原堿及 3 個單酯型生物堿 的總含量呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），與 5-HMF 的含 量呈負相關(guān)。

5-HMF 是麥拉德（Maillard）反應(yīng)的產(chǎn)物之一， 目前，包括 5-HMF 在內(nèi)的 Maillard 反應(yīng)產(chǎn)物的藥理 和毒理作用存在較多爭議，加之附子本身為毒性中 藥，因此控制其 5-HMF 的含量有重要意義。 本研究采用色差儀對附子進行色澤的客觀量化， 實現(xiàn)了附子的傳統(tǒng)性狀描寫從主觀經(jīng)驗向客觀量化 的轉(zhuǎn)變；在現(xiàn)有研究基礎(chǔ)上優(yōu)化了 5-HMF 的 HPLC 含量測定方法 ，進行了方法學(xué)的驗證，并進行了 附子中 5-HMF 的 HPLC 含量測定；進行色澤量化指 標與 3 個單酯型生物堿含量及其總含量、5-HMF 含 量的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)了它們之間的對應(yīng)關(guān)系，對于 全面評價附子的質(zhì)量提供了科學(xué)的依據(jù)。