在人體新陳代謝過程中會(huì)產(chǎn)量大量的自由基， 它們具有強(qiáng)氧化性，會(huì)造成人體內(nèi)生物膜及細(xì)胞功 能的傷害，進(jìn)而加大心血管疾病及癌癥發(fā)生的風(fēng) 險(xiǎn)，同時(shí)還會(huì)加快人體衰老的進(jìn)程。有研究發(fā)現(xiàn)， 抗氧化劑具有明顯清除自由基的能力，能夠減少其 對(duì)人體的危害。近些年，隨著人們安全意識(shí)的逐 漸增強(qiáng)，開發(fā)綠色高效的天然抗氧化劑已成為研究 的熱點(diǎn)。玉米須是玉米的花柱和柱頭，資源豐富， 含有多種功能性成分，具有降血壓、降血脂、抗氧 化、抗腫瘤等功能，其中，玉米須中含有的多酚和 黃酮類物質(zhì)發(fā)揮著一定的功效。

本試驗(yàn)以玉米須為原料，采用超聲輔助浸提 法，研究不同提取溶劑對(duì)玉米須提取物的含量及其抗氧化活性的影響，旨在選出超聲輔助提取的最佳 溶劑，進(jìn)一步為天然無(wú)毒抗氧化劑的開發(fā)提供理論 基礎(chǔ)，同時(shí)對(duì)玉米副產(chǎn)物的綜合開發(fā)利用具有一定 的實(shí)踐參考價(jià)值。

供試玉米須采集于綏化市田間，將其干燥、粉 碎、過 0.59 mm 篩，備用。 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品 （天津市光復(fù)精細(xì)化工研究 所）；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（上海源葉生物科技有限公司）；福 林酚試劑 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；1，1- 二 苯基 -2- 苦基肼 （DPPH）（分析純）（美國(guó) Sigma 公司）；2，2- 聯(lián)氮 - 雙 -（3- 乙基苯并噻唑 -6- 磺酸） （ABTS）（湖南匯百特生物科技有限公司）；亞硝酸 鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、碳酸鈉、三氯乙酸、氯化鐵、 硫酸亞鐵等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

TU-1901 雙光束紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；KQ-200VDE 雙頻數(shù)控 超聲波清洗器 （昆山市超聲儀器有限公司）；80-2B 臺(tái)式離心機(jī)（湖南星科科學(xué)儀器有限公司）；HH-6 數(shù) 顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公 司）；RE-52A 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）。

稱取玉米須 3 g，按料液比 1∶ 15（g/mL）分別加入蒸餾水、甲醇、70%甲醇、50%甲 醇、乙醇、70%乙醇和 50%乙醇的溶劑混勻后進(jìn)行超 聲輔助提取，設(shè)定超聲溫度 60 ℃，超聲時(shí)間 40 min； 超聲提取結(jié)束后，3 500 r/min 離心 10 min，濾渣按 上述方法再進(jìn)一步提取，合并 2 次濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 濃縮，濾液定容到 50 mL 容量瓶中，低溫保存，備用。

采用福林酚比色法測(cè) 定總多酚含量。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，在最大吸收 波長(zhǎng) 760 nm 處測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，制 作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程 y＝5.195 4x－0.168 （R2 ＝0.992 1）。取 5 mL 不同溶劑的提取物，依標(biāo)準(zhǔn) 曲線的方法測(cè)定不同溶劑提取物的吸光值，計(jì)算各 提取溶劑提取物中多酚的含量，結(jié)果以各提取物中 含有相當(dāng)沒食子酸的毫克數(shù)表示（mg/g）。

采用硝酸鋁比色法測(cè) 定總黃酮含量。以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)品，在 510 nm 處 測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得 到回歸方程 y＝4.571 4x＋0.047 2（R2 ＝0.995 6）。取 5 mL 不同溶劑提取物，依標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定不 同溶劑提取物的吸光值，計(jì)算其黃酮含量，結(jié)果以 各提取物中含有相當(dāng)蘆丁的毫克數(shù)表示（mg/g）。

還原能力的測(cè)定采用 吸光值法；參照 MA 等的方法測(cè)定 1，1- 二苯 基 -2- 苦肼基自由基（DPPH·）的清除能力；參照 XIANG 等的方法測(cè)定超氧自由基（O2 ·）的清除能 力；參照 CHEN 等的方法測(cè)定羥自由基（·OH）的 清除能力；參照 LI 等的方法測(cè)定 2，2- 聯(lián)氮 - 二 （3- 乙基 - 苯并噻唑 -6- 磺酸）二銨鹽（ABTS+ ·）自 由基的清除能力。 1.4 數(shù)據(jù)處理 每個(gè)試驗(yàn)都重復(fù) 3 次，計(jì)算結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)·1140·差表示，采用 Excel 2010 作圖，差異顯著性分析采 用 Statistix 8.0 軟件，相關(guān)性分析采用 SPSS 軟件進(jìn)行。

由表 1 可知，不同溶劑提取物中總黃酮和總多 酚的含量存在一定的差異。總黃酮含量在不同溶劑 提取液中約為 0.25～0.65 mg/g，其中，70%乙醇中的 總黃酮含量最高；其次為蒸餾水，但其與 70%乙醇 間差異不顯著（P＞0.05）；含量最低的為 50%甲醇 提取劑，總黃酮含量為（0.25±0.02）mg/g。玉米須不 同溶劑提取物中總多酚含量為 0.41～0.79 mg/g，其 中，以 70%乙醇為溶劑時(shí)提取物中的總多酚含量較 高，而以甲醇為溶劑的提取物中的總多酚含量最 低。綜合分析可知，提取玉米須的總黃酮和總多酚 適于采用 70%的乙醇作為提取溶劑。華艷宏等研 究也發(fā)現(xiàn)，藜麥種子中的總黃酮和總多酚利用 70% 的乙醇作為提取溶劑時(shí)，提取量較高。

2.2 不同溶劑提取物抗氧化活性分析

2.2.1 不同溶劑提取物的還原能力分析

還原能 力和抗氧化能力成正比關(guān)系，即還原能力越強(qiáng)抗氧 化能力越強(qiáng)，因此，還原能力大小能夠表征不同 溶劑提取物的抗氧化活性大小。有研究報(bào)道，具有 抗氧化性的物質(zhì)能將鐵氰化鉀還原，得到的還原產(chǎn) 物再與三氯化鐵反應(yīng)生成有色物質(zhì)，在 700 nm 處 有最大吸光度，吸光度越大，說明生成的有色物質(zhì) 越多，即還原能力越強(qiáng)。不同溶 劑提取物中的總黃酮和總多酚對(duì)鐵均具有一定的 還原能力，但存在一定的差異，其中，以 70%甲醇作 為提取劑時(shí)還原能力最高，但與 70%乙醇間差異不 顯著（P＞0.05）；蒸餾水提取物的還原能力最弱；甲 醇與乙醇提取物的還原能力顯著高于蒸餾水 （P＜ 0.05），但二者間差異不顯著（P＞0.05）。

DPPH 自由基是一種很穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，清除方法操作簡(jiǎn)便，常作為抗氧化能力的 評(píng)價(jià)指標(biāo)。DPPH 自由基清除率越高，抗氧化能力 越強(qiáng)。不同溶劑提取物在一定程度上 均可以清除 DPPH 自由基，提取溶劑為 70%乙醇 時(shí)，清除能力顯著高于其他溶劑（P＜0.05）；70%甲 醇提取物的清除能力次之；50%甲醇、乙醇以及蒸 餾水作為溶劑時(shí)的提取物，其清除率集中在 61%～ 65%，差異不顯著（P＞0.05）；甲醇作為提取溶劑時(shí)， 表現(xiàn)出的清除能力最弱。

本研究表明，不同溶劑玉米須提取物中的總多 酚和總黃酮含量不同，而且本研究采用還原力、 DPPH 自由基、超氧自由基、羥基自由基以及 ABTS 自由基清除率對(duì)不同溶劑提取物的抗氧化能力進(jìn) 行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，采用 70%乙醇作為溶劑得到 的提取物抗氧化能力最強(qiáng)，其次為 70%甲醇提取 物。提取物中的總多酚和總黃酮含量與抗氧化能力 之間的相關(guān)性分析表明，總多酚與抗氧化能力之間 相關(guān)性顯著，而總黃酮與抗氧化能力之間的相關(guān)性 較差。同時(shí)，5 種抗氧化評(píng)價(jià)指標(biāo)之間的相關(guān)性表 明，不同抗氧化體系之間并不都呈正相關(guān)。這可能 是由于不同溶劑提取物中起抗氧化作用物質(zhì)的結(jié) 構(gòu)和性質(zhì)不同，以及由 5 種抗氧化評(píng)價(jià)指標(biāo)的反 應(yīng)機(jī)制不同所致。結(jié)果證實(shí)，70%乙醇玉米須提取 物具有較高的抗氧化能力，該研究結(jié)果為超聲輔助 提取溶劑的選擇提供了理論基礎(chǔ)，同時(shí)為抗氧化功 能食品等領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用及抗氧化機(jī)制的研究奠 定了理論參考