食品添加劑是指為改善食品品質(zhì)和色、香、味， 以及為防腐和加工工藝的需要而加入食品中的化學(xué) 合成或者天然物質(zhì)。近年來，隨著食品工業(yè)的發(fā) 展，食品添加劑使用頻率越來越多，違規(guī)使用或超 量使用食品添加劑問題也越頻繁，食品質(zhì)量安全問 題也越來越受到各方的關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

菠 蘿啤 、 梨 汁、 水蜜 桃汁， 市售； 乙 酸 銨 （CH3CO2NH4，優(yōu)級(jí)純），國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司提 供；甲醇 （色譜純），賽默飛世爾科技有限公司提供； 安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液 （DRE- C1001800）、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 （DRE- C16901010），Dr.Ehrenstorfer 公司提供；山梨 酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 （BW900997- 1000- L，1 000 μg/mL）、苯 甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 （BW900998- 1000- L，1 000 μg/mL）， 壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供；脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 （21680），北京曼格生物科技公司提供。 注：實(shí)驗(yàn)室用水是由 Milli- Q Advantage A10 系 統(tǒng)制備的高純水，所用容器使用前均用超純水清洗 晾干。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1290 系列 （DAD 檢測(cè)器） 高效液相色譜 儀，美國(guó)安捷倫科技有限公司產(chǎn)品；Mill- Q Advantage A10 型純水器，美國(guó) Millipore 科技有限公司產(chǎn) 品；MS303S 型分析天平，瑞士梅特勒 - 托利多科技 有限公司產(chǎn)品；UV2600 型紫外可見光分光光度計(jì)， 島津公司產(chǎn)品；昆山舒美KQ-500DE，昆山市超聲儀器有限公司 產(chǎn)品。

1.3 溶液配制

1.3.1 流動(dòng)相

溶劑 A （0.02 mol/L 乙酸銨溶液） 稱取乙酸銨 1.54 g，用水溶解，定容至 1 000 mL 容量瓶，經(jīng) 0.22 μm 微孔濾膜過濾，超聲脫氣 30 min；溶劑 B 為色譜純甲醇。 1.3.2 亞鐵氰化鉀溶液 稱取 106 g 亞鐵氰化鉀，加入適量水溶解，用水 定容至 1 000 mL。

1.3.3 乙酸鋅溶液

稱取 220 g 乙酸鋅溶于少量水中，加入 30 mL 冰 醋酸，用水定容至 1 000 mL。

1.3.4 安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 （1 000 μg/mL）

準(zhǔn)確稱量安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)品 0.10 g 用水溶解，定容 至 100 mL 容量瓶。

1.3.5 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 （1 000 μg/mL）

準(zhǔn)確稱量糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品 0.10 g 用水溶解，定容 至 100 mL 容量瓶。

1.3.6 脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 （1 000 μg/mL）

準(zhǔn)確稱量脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 0.10 g 用水溶解，定 容至 100 mL 容量瓶。

1.3.7 5 種添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（50 μg/mL）

分別吸取安賽蜜、糖精鈉、脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 儲(chǔ)備液，以及山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 2.5 mL 用水 稀釋定容至 50 mL。

1.3.8 5 種添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液

分別準(zhǔn)確吸取混合標(biāo)準(zhǔn)中間液 20，40，100， 200，400，1 000 μL，加水定容至 1 mL，分別配制 質(zhì)量濃度為 1，2，5，10，20，50 μg/mL 的混合標(biāo) 準(zhǔn)系列工作溶液。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 樣品處理

稱取約 5.000 g 樣品于 50 mL 比色管中，加水約 25 mL 渦旋混勻，含二氧化碳樣品置于超聲清洗儀中 超聲處理 20 min，不含蛋白質(zhì)樣品直接加水定容至刻 度，含蛋白質(zhì)樣品分別加入 5 mL 亞鐵氰化鉀溶液， 5 mL 乙酸鋅溶液，然后加水至刻度，混勻，以轉(zhuǎn)速 8 000 r/min 離心 5 min，將上清液收集經(jīng) 0.22 μm 濾 膜過濾，上機(jī)待測(cè)。同樣方法作空白樣。 （注：不 含蛋白的飲料可以不加如亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液）

1.4.2 色譜條件

色譜柱：Venusil ASB C18 柱，4.6 mm×250 mm， 5 μm；進(jìn)樣量 10 μL，柱溫 35 ℃，DAD 檢測(cè)器檢測(cè) 波長(zhǎng) 230 nm，流動(dòng)相 A 0.02 mol/L 乙酸銨溶液，流 動(dòng)相 B 甲醇，A∶B = 95∶5，等梯度洗脫。

1.4.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將配制好的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液在 1.4.2 中色 譜條件下進(jìn)行分析，以混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液濃度 為橫坐標(biāo) （X）、相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo) （Y），繪制標(biāo) 準(zhǔn)工作曲線。

2 結(jié)果與分析

由于飲料中會(huì)不同程度地添加果膠、黃瓜膠、 羧甲基醋酸纖維鈉等添加劑來增加口感，因此對(duì)有 些含乳飲料在前處理過程中需要沉淀蛋白，試驗(yàn)選 擇亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液作為蛋白沉淀劑。與國(guó) 標(biāo)不同的是，標(biāo)準(zhǔn) GB/T 23377—2009 食品中脫氫乙 酸的測(cè)定中，針對(duì)果蔬汁的測(cè)定中需要調(diào)節(jié) pH 值， 用 固 相 萃 取 柱 來 提 取 ， 過 程 繁 瑣 復(fù) 雜 ； GB/T 5009.140—2003 飲料中乙?；前匪徕?（安賽蜜） 的 測(cè)定中，樣品處理過程也需要用固相萃取柱上樣、 洗脫，過程繁瑣。采用超聲提取方法簡(jiǎn)單、便于操 作，大大減少了前處理的時(shí)間，同時(shí)保證結(jié)果的準(zhǔn) 確性。由于這幾種添加劑都易溶于水，且超聲提取 過程中可以加快分子運(yùn)動(dòng)，加速沉淀劑與溶劑之間 的接觸，促使某些成分脫附、溶解，加快提取過程， 增大效率，經(jīng)過多次試驗(yàn)分析得知，超聲提取 20 min 即可滿足加標(biāo)回收率要求。多種物質(zhì)同時(shí)檢測(cè)時(shí)，不僅要保證每種組分的 靈敏度，還需定量方法簡(jiǎn)便。試驗(yàn)采用分光光度計(jì) 在 190~400 nm 范圍內(nèi)對(duì)各組標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行光譜掃 描，分析安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙 酸這 5 種添加劑的吸光度圖譜可知，這 5 種組分的最 大吸收波長(zhǎng)依次為 228，220，226，254，235.5 nm。 為兼顧各組分的檢測(cè)靈敏度，最終選擇 230 nm 作為 檢測(cè)波長(zhǎng)，此條件下繪制檢測(cè)色譜圖，可以完全分離，且分離效果較好。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜檢測(cè)法，可同時(shí)測(cè)定飲料中安 賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸這 5 種常 見的食品添加劑，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、分析時(shí)間短，具 有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，且方法操作簡(jiǎn)單、實(shí)用 性強(qiáng)，能夠滿足實(shí)際工作的需要，為食品監(jiān)管部門、 企業(yè)等檢測(cè)機(jī)構(gòu)提供技術(shù)支持。



 

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