中藥具有多成分、多靶點(diǎn)作用特點(diǎn)，多成分質(zhì)量 控制模式已成為中藥質(zhì)量控制的主要趨勢(shì)和重要研 究方向。中藥常用的多成分質(zhì)量控制模式基本采用以 多種單一對(duì)照品作為對(duì)照物質(zhì)進(jìn)行中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)，而 多種單一對(duì)照品的模式由于存在化學(xué)對(duì)照品分離難 度大、生產(chǎn)成本及技術(shù)要求高、檢測(cè)成本昂貴等問(wèn)題， 在實(shí)際應(yīng)用中受到諸多限制。為解決上述問(wèn)題，有 研究者提出運(yùn)用一測(cè)多評(píng)法開(kāi)展中藥質(zhì)量控制，但該 方法在相對(duì)校正因子的定量、指標(biāo)成分的色譜峰定 性，以及方法的適用性和耐用性等方面尚存在一些問(wèn) 題。因此，建立一種適合多成分中藥質(zhì)量控制的 方法是解決中藥質(zhì)量控制問(wèn)題的有效途徑之一，而運(yùn) 用中藥對(duì)照提取物對(duì)中藥進(jìn)行質(zhì)量控制，可以在解決 對(duì)照品稀缺、多成分同時(shí)定量困難等問(wèn)題方面有較大改善。

SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有 限公司；KQ-500DE 型數(shù)控超聲波清洗器,昆山舒美超聲儀器有限公司；Waters 高效液相色譜儀（包括 1525 型二元高壓梯度泵系統(tǒng)、2998 型 DAD 檢測(cè)器、2414 型柱溫控制系統(tǒng)、2707 型自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)、Breeze 色譜 工 作 站 ）， 美 國(guó) Waters 公司；穩(wěn)定性試驗(yàn)箱 （SHH-GSD），重慶永生實(shí)驗(yàn)儀器廠；Sunfire C18 色 譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；Sartorious BT 25S 型十萬(wàn)分之一電子分析天平，北京賽多利斯儀器有限 公司。蕓香柚皮苷對(duì)照品（批號(hào) MUST-17030408，純度 99.20%）、柚皮苷對(duì)照品（批號(hào) MUST-17040102，純 度 98.28%）、新橙皮苷對(duì)照品（批號(hào) MUST-17040707， 純度 98.79%），成都曼斯特生物科技有限公司；橙皮 苷對(duì)照品（批號(hào) 721-860110，純度 98.08%），中國(guó)食 品藥品檢定研究院。甲醇（色譜純，F(xiàn)isher 公司），屈 臣氏純凈水，其他試劑均為分析純。21 批枳實(shí)藥材分 別購(gòu)自不同地區(qū)，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)劉元艷教授鑒定 為蕓香科植物酸橙 Citrus aurantium L.及其栽培變種 或甜橙 Cirtus sinensis Osbeck 的干燥幼果，來(lái)源信息 見(jiàn)表 1。

取枳實(shí)藥材（S21），適當(dāng)破碎（綠豆大），用 8 倍量 70%乙醇（含 0.5%氨水）回流提取 2 次，每次 1.5 h，合并 2 次提取液，減壓濃縮至無(wú)醇味，冷凍干 燥，即得提取物浸膏。提取物浸膏加 10 倍量水超聲 （功率 100 W，頻率 40 kHz）分散 30 min，3000 r/min 離心 30 min。殘?jiān)糠掷鋬龈稍?；上清液?0.5 BV/h 吸附流速通過(guò) AB-8 大孔吸附樹(shù)脂柱，以 1 BV/h 洗脫 流速，依次用水洗脫 5 BV、40%乙醇洗脫 4 BV，收 集 40%乙醇洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥，即得 40% 乙醇洗脫部位。殘?jiān)c 40%乙醇洗脫部位合并，即得 枳實(shí)黃酮對(duì)照提取物。采用 Sunfire C18 色譜柱（4.6 mm×250 mm， 5 μm），流動(dòng)相為甲醇-水-乙酸（38∶58∶4），流速 1 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng) 283 nm，柱溫 35 ℃，進(jìn)樣量 10 μL。

本試驗(yàn)中，昆山舒美取同一批次枳實(shí)藥材，按上述方法分別制備 3 批枳實(shí)黃酮對(duì)照提取物。所得枳實(shí) 黃酮對(duì)照提取物中蕓香柚皮苷的含量為 1.65%～ 1.71%，柚皮苷的含量為 31.17%～31.54%，橙皮苷的 含量為 2.35%～2.44%，新橙皮苷的含量為 33.63%～ 33.89%，表明枳實(shí)黃酮對(duì)照提取物中的化學(xué)成分比例 相對(duì)固定。在枳實(shí)黃酮對(duì)照提取物制備工藝研究中發(fā)現(xiàn)， 70%乙醇提取物浸膏加水分散后存在水不溶物。 HPLC 含量測(cè)定結(jié)果顯示水不溶物中柚皮苷、新橙皮 苷含量較高。因此，本試驗(yàn)考察了加入不同倍量的水 對(duì)提取物浸膏分散的影響，結(jié)果表明，當(dāng)加入 10 倍 量水時(shí)，水不溶物中柚皮苷、新橙皮苷的含量最高。 針對(duì) 70%乙醇提取物浸膏的水溶部分，本試驗(yàn)選擇 AB-8 大孔樹(shù)脂對(duì)其黃酮類成分進(jìn)行富集。依次用不 同濃度乙醇進(jìn)行洗脫，結(jié)果表明 40%乙醇洗脫效果較 好，將水不溶部分與 40%乙醇部位合并即得枳實(shí)黃酮 對(duì)照提取物。



 

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