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昆山超聲分析不同炮制法對黨參化學(xué)成分及產(chǎn)品

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-07-25 09:03【

黨參 Codonopsis pilosula ( Franch.) Nannf. 為臨 床常用補益中藥材,性味甘、平,主歸肺脾二經(jīng), 具有補中益氣、滋脾養(yǎng)肺等效果,臨床多用于脾胃 虛弱、體倦無力、口渴少食、中氣不足、潤肺化 痰、解毒平肝等。關(guān)于黨參的歷史記載較多, 《綱目拾遺》稱其具有益肺氣、治肺虛、補血等作 用, 《本草從新》中提到其 “補中益氣,和脾胃, 除煩渴”。近年來研究顯示,黨參在提高機體免 疫力、增強機體造血功能、調(diào)節(jié)機體腸胃蠕動、改 善血液循環(huán)等方面具有良好效果,而且含有多種人 體必需的氨基酸及微量元素,可作為人參理想的替 代品,2010 年版 《中國藥典》中共收錄黨參、 素花黨參、川黨參 3 個品種,稱其 “補中益氣, 健脾益肺,用于脾肺虛弱,氣短心悸,食少便溏, 虛喘咳嗽,內(nèi)熱消渴”。中藥炮制是中藥材應(yīng)用于 臨床治療前或制備成各種劑型前需要進行的加工過 程,有助于降低甚至消除藥物的烈性、毒性和不良 反應(yīng),增強藥物作用,提高臨床療效,同時除去藥材中的雜質(zhì)和非藥用部分,也有助于純凈藥材、保 證質(zhì)量及用量準確。文獻中記載的黨參炮制方 法較多


1 材料

Agilent 1200 高效液相色譜儀 ( 美國 Agilent 公 司) ; CQ-250 超聲波清洗器 ( 上海躍進醫(yī)用光學(xué)器械廠) ; Agilent Eclipse XDB-C18色譜柱 ( 4. 6 mm ×150 mm,5 μm,昆山市超聲儀器有限公司) ; RE-52 旋 轉(zhuǎn) 蒸 發(fā) 儀 ( 上海亞榮生化儀器廠) ; MP17C-KE 微波爐 ( 美的公司) 。 黨參 由 浙 江 省 永 康 醫(yī) 藥 公 司 提 供 ( 批 號 20120909) ,經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)系鑒定教研室 專家鑒定為桔梗科植物黨參 Codonopsis pilosula ( Franch.) Nannf. 的干燥根。黨參炔苷對照品 ( 批 號 136085375,江西本草天工科技有限公司) 。冰 醋酸、乙腈、乙醇等試劑為色譜純 ( 美國 Sigma公司) 。


2 方法與結(jié)果

2. 1 炮制工藝

2. 1. 1 米制


將米置于鍋內(nèi),用文火加熱,噴灑 純凈水少許,以米粘貼于鍋上為宜,待煙冒出時即 加入切好的黨參段,翻炒至微黃色后取出放涼,將 米粒去除。每 100 kg 黨參使用 20 kg 米。


2. 1. 2 酒制

將黨參置于米酒中拌勻,置于熱鍋 中炒制,以近乎干燥為宜,取出放涼。每 100 kg 黨參使用 1. 5 kg 米酒。


2. 1. 3 土制

取灶心土置于熱鍋內(nèi)炒制,以將土 炒松為宜,后加入黨參片炒制至有香氣逸出,取出 將土 篩 去 后 放 涼。每 100 kg 黨 參 使 用 30 kg 灶 心土。


2. 1. 4 蜜制

取蜜用開水稀釋后與黨參片一同加 入鍋中拌勻,文火加熱,炒制棕黃色且不粘手為 宜,取出放涼。每 100 kg 黨參使用 20 kg 蜜。


2. 1. 5 炒制

將黨參片或黨參段置于鍋內(nèi),文火 炒制,以黨參變?yōu)樽攸S色、表面略有焦斑為宜,取 出放涼。


2. 2 觀察指標

不同炮制方法對黨參中多糖、黨 參炔苷含有量及產(chǎn)品質(zhì)量的影響。


2. 3 檢測方法

2. 3. 1 黨參炔苷含有量

2. 3. 1. 1 色譜條件


Agilent Eclipse XDB-C18色譜 柱 ( 4. 6 mm ×150 mm,5 μm) ; 流動相乙腈-1%冰 醋酸; 體積流量 1 mL /min; 柱溫 25 ℃ ; 檢測波長 267 nm。


2. 3. 1. 2 對照品溶液制備

準確稱量 10 mg 干燥 至恒定質(zhì)量的黨參炔苷對照品,與流動相一同加入 10 mL 量瓶中,定容,即得( 1 mg /mL) ,待用。


2. 3. 1. 3 樣品處理

將黨參磨成細粉,準確稱取 5. 000 g,加入 50 mL 50%酒精,于 60 ℃ 水浴鍋中 水浴處理 30 min 后微波爐加熱 5 min,濾過,濾液 減壓回流至干,加入 10 mL 量瓶中,流動相定容后 備用。


2. 3. 1. 4 線性關(guān)系考察

依次取配制好的對照品 溶 液 1. 0、 5. 0、 10. 0、 20. 0、 25. 0 μL, 在 “2. 3. 1. 1”項 條 件 下 進 樣。以峰面積為縱坐標 ( Y) ,樣品量為橫坐標 ( X) 進行回歸,得方程Y = 320. 22X + 9. 365 ( r = 0. 999 8 ) , 在 0. 02 ~ 0. 50 mg /mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。


2. 3. 1. 5 精密度試驗

將對照品溶液連續(xù) 3 d 在 “2. 3. 1. 1”項條件下進樣 6 次,測得黨參炔苷峰面積 RSD 0. 03%,表明儀器精密度良好。


2. 3. 1. 6 穩(wěn)定性試驗

將黨參制成供試品溶液, 每隔 1 h 在 “2. 3. 1. 1”項條件下進樣,連續(xù) 6 次, 測得黨參炔苷峰面積 RSD 0. 08%,表明供試品溶 液穩(wěn)定性良好。


2. 3. 1. 7 樣品含有量測定

對不同炮制方法下黨 參進行分析,計算黨參炔苷含有量。


2. 3. 2 多糖含有量

2. 3. 2. 1 線性關(guān)系考察


準確稱取葡萄糖對照品 12. 1 mg 后加水溶解,并于 100 mL 量瓶中定容至 0. 121 mg /mL, 吸 取 0、 0. 2、 0. 4、 0. 5、 0. 6、 0. 7、0. 75 mL 于量筒中,蒸餾水定容至 1 mL,加 入 2. 0 mL 5%苯酚溶液后搖勻,滴加 5. 5 mL 濃硫 酸,搖勻后置于 60 ℃ 水浴鍋內(nèi)30 min,在 490 nm 波長處測定吸光度。以溶液質(zhì)量濃度為橫坐標 ( X) ,吸光度為縱坐標 ( A) 進行回歸,得方程為 A = 0. 008 6X + 0. 014 5 ( r = 0. 999 1) ,在 0. 000 ~ 0. 011 mg /mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。


2. 3. 2. 2 多糖含有量測定

準確稱取干燥至恒定 質(zhì)量的樣品 23. 5 mg,加水溶解,置于 100 mL 量 瓶中定容,吸取 0. 2 mL,按 “2. 3. 2. 1”項下方法 測定吸光度,根據(jù)標準曲線得到多糖質(zhì)量濃度,計 算含有量。


2. 4 檢測結(jié)果

2. 4. 1 對黨參質(zhì)量、含水量及黨參炔苷含有量的影響


含水量測定選擇甲苯法,精確稱取不同炮制 方法所得黨參 50. 0 g 進行蒸餾,測定其含水量。 結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同炮制方法對黨參含水量及黨參炔苷 含有量的影響不同,炮制后黨參質(zhì)量及含水量依次 為蜜制>米制>酒制>土制>炒制,黨參炔苷含有量 依次為酒制>米制>炒制>蜜制>土制。



2. 4. 2 對黨參中多糖含有量的影響

不同炮制方 法對黨參中多糖含有量具有較大影響,依次為酒 制>蜜制>炒制>土制>米制。與生品比較,酒制和 蜜制方式可增加該成分含有量,而炒制、土制、米 制可導(dǎo)致其出現(xiàn)不同程度的降低。


3 討論

黨參炔苷作為黨參藥理作用最關(guān)鍵的化合物之 一,是炮制過程中標志性檢測成分,通常以其作為 衡量不同產(chǎn)地黨參質(zhì)量的重要指標,動物實驗 已證實黨參炔苷對機體胃黏膜的保護具有重要作用。