《中醫(yī)方劑臨床手冊(cè)》中收錄了二仙湯，而這一 僅由淫羊藿、仙茅、當(dāng)歸、巴戟天、黃柏、知母組成的 藥方，是以滋陰溫腎與益精降火并重的良方，通過(guò) 這 2 個(gè)功效對(duì)人體進(jìn)行雙重調(diào)節(jié)，不僅對(duì)婦女更年 期綜合征、性功能減退等有療效，對(duì)骨質(zhì)疏松癥，肩周炎和老年性失眠也有顯著的改善 作用。

儀器型號(hào)為 APS-6080A 的高效液相色 譜儀購(gòu)自德國(guó) AUPOS 科技有限公司( 其中恒溫箱、 自動(dòng)進(jìn)樣器和熒光檢測(cè)器的儀器型號(hào)分別為: APS5600、Spark Alias 和 APS-5600A) ; 產(chǎn)品型號(hào)為 CNT SEC-300 的色譜柱購(gòu)自河南奧普斯儀器設(shè)備有限公 司( 孔 徑: 300 ，規(guī) 格: 4. 6 mm × 150 mm，粒 度: 5 μm) ; 產(chǎn)品型號(hào)為 FA2004B 的電子分析天平( 讀數(shù) 精度: 0. 1 mg) 購(gòu)自上海精科天平儀器廠; 產(chǎn)品型號(hào) 為 KQ-250DE 的臺(tái)式數(shù)控超聲波清洗器購(gòu)自昆山市超聲儀器有限公司。

所有對(duì)照品均由上海純優(yōu)生物科技有 限公司購(gòu)入，其中淫羊藿苷對(duì)照品純度≥98% ( 對(duì)照 藥品批號(hào): 489-32-7; 對(duì)照品編號(hào): P0057) 、淫羊藿次 苷Ⅱ?qū)φ掌芳兌?ge;95% ( 對(duì)照藥品批號(hào): 489-32-7; 對(duì)照品編號(hào): P0057) 、朝藿定 B 對(duì)照品純度≥98% ( 對(duì)照藥品批號(hào): 110623-73-9; 對(duì)照品編號(hào): P0355) 、朝藿 定 C 對(duì) 照 品 純 度 ≥ 98% ( 對(duì) 照 藥 品 批 號(hào): 110642-44-9; 對(duì)照品編號(hào): P0356) 。HPLC 級(jí)色譜純 乙腈和 HPLC 級(jí)色譜純甲醇均購(gòu)自德國(guó)默克( MEＲCK) 公 司 ( 藥品批號(hào)分別為: 75-05-8; 67-56-1 ) ; HPLC 級(jí)色譜純甲酸購(gòu)自美國(guó)飛世爾( FISHEＲ) 公 司( 藥品批號(hào): 64-18-6) ; HPLC 級(jí)色譜純甲酸購(gòu)自美 國(guó)天地( ACS) 公司( 藥品批號(hào): 631-61-8) ; 本研究中 所有的純凈水均由河南中美純水有限公司提供。

二仙湯: 淫羊藿、仙茅、當(dāng)歸、巴戟 天均為 9 g，黃柏、知母均為 6 g。所有藥材均由本院 藥房提供。其中淫羊藿采用 4 個(gè)不同產(chǎn)地的藥材， 分別為四川、陜西、湖南、湖北。

進(jìn)樣體積為 1 μL; 色譜柱的的溫 度控制在 40 ℃ ; 流動(dòng)相 A 以 0. 1% 色譜純甲酸和 5 mmol /L的色譜純乙酸銨均勻混合而成; 流動(dòng)相 B 以色譜純甲醇和超純水均勻混合而成，研究中所有高 效液相色譜線性梯度洗脫程序均根據(jù)表 1 進(jìn)行。檢 測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置在 270 nm 時(shí)可以檢測(cè)到較多的吸收峰。、

采用精確度為十萬(wàn)分之一 的電子分析天平精密分別精密稱取淫羊藿苷對(duì)照 品、淫羊藿次苷Ⅱ?qū)φ掌?、朝藿?B 對(duì)照品和朝藿定 C 對(duì) 照 品 分 別 各 19. 87 mg、19. 96 mg、11. 65 mg、 12. 03 mg，分別放置在用標(biāo)簽標(biāo)記好 4 個(gè)對(duì)照品名 的 10 mL 容量瓶中，并用色譜純甲醇定容至容量瓶 刻度，配制成所需質(zhì)量濃度的單一對(duì)照品溶液，最終淫羊藿苷對(duì)照品、淫羊藿次苷Ⅱ?qū)φ掌?、朝藿?B 對(duì) 照品和朝藿定 C 對(duì)照品的質(zhì)量濃度分別為 1. 987 g / L、1. 996 g /L、1. 165 g /L、1. 203 g /L。將 4 種對(duì)照品 溶液混合搖勻后，即得混合對(duì)照品溶液。根據(jù) 1. 3 二仙湯藥物組成中淫羊藿藥材的用量，加入 8 倍超 純水，煮沸后回流提取濃縮液 2 h，分別提取 3 次后， 定容在 25 mL 的容量瓶中并密閉塞緊瓶蓋，后放于 超聲波中進(jìn)一步濃縮提取 30 min，最后采用孔徑只 有 0. 2 μm 的有機(jī)過(guò)濾膜對(duì)二仙湯濃縮液進(jìn)行過(guò)濾， 所得的續(xù)濾液即為淫羊藿單味藥供試品溶液。

近年來(lái)，二仙湯的相關(guān)藥理實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)， 其中淫羊藿含有大量的黃酮類成分，本研究欲通過(guò) 對(duì)淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定 B、朝藿定 C 等 主要黃銅類成分監(jiān)測(cè)并采用 HPLC 明確各種成分含 量，為二仙湯的復(fù)方藥物質(zhì)量控制提供更豐富的研 究資料。高效液相色譜法作為常用快捷可靠的液相 色譜技術(shù)，為復(fù)雜體系中藥復(fù)方的藥物成分分離分 析提 供 了 良 好 的 平 臺(tái)。HPLC 的穩(wěn)定性十分良好，本研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)，因此本研究采 用 HPLC 測(cè)定二仙湯中 4 種淫羊藿黃酮類成分能夠 把每次測(cè)量的誤差降到最低，進(jìn)一步保障檢測(cè)結(jié)果 的準(zhǔn)確性，為二仙湯的復(fù)方藥物質(zhì)量控制和相關(guān)新 制劑研究提供高可信度的參考依據(jù)。本研究通過(guò)比 較二仙湯水煎劑和淫羊藿單味藥材水煎劑中淫羊藿 黃酮類成分含量，結(jié)果表明二仙湯中淫羊藿黃酮類 成分淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、朝藿定 B、朝藿定 C 的含量均較淫羊藿單位要從水煎劑高，這 4 種黃酮 類成分的含量以朝藿定 C 最高，淫羊藿苷次之，接著 是淫羊藿次苷Ⅱ，而朝藿定 B 含量最少。



 

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