中華苦荬菜 [Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai] 又 名小苦苣菜、山苦荬等,為菊科苦荬菜屬植物小苦 苣菜的干燥全草。全草入藥,性寒味苦,具有保肝、 清熱解毒作用,主要用于治療黃疸、胃炎、痢疾、肺 熱咳嗽等多種疾病。中華苦荬菜中黃酮類化合物 含量較高,主要有木犀草素 -7-O-β-D 葡萄糖苷 (luteolin-7-O-β-D-glucoside),洋芹素 -7-O-β-D 葡萄糖苷(apigenin-7-O-β-D- glucoside)和木犀 草素(luteolin)等。
1 材料與儀器
1.1 材料與試劑
中華苦荬菜的干燥全草自采于山西左權(quán),經(jīng) 山西中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院裴香萍副教授鑒定,鑒 定結(jié)果:本品為菊科植物小苦苣菜 [Ixeris chinensis (Thunb.)Nakai] 的干燥全草;木犀草苷對照品購自 中國藥品生物制品檢定所,批號:111720-200604; 大 孔 吸 附 樹 脂(NKA-9 型、S-8 型、X-5 型、D4020 型),南開大學(xué)化工廠;大孔吸附樹脂(D-101 型、AB-8 型、HPD-100 型、HPD-600 型),滄州寶恩吸附 材料科技有限公司。甲醇為色譜純;乙醇、冰醋酸 為分析純;水為雙重蒸餾水。
1.2 儀器
Waters 2695 高效液相色譜儀(美國沃特斯公 司),Waters 2998 PAD 檢測器,Waters Empower 色譜 工作站;昆山舒美KQ3200E 型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司);梅特勒 AB135-S 電子分析天平,上海梅 特勒 - 托利多有限公司;RE-52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上 海亞榮生化儀器廠)。
2 方法和結(jié)果
精 密 稱 取 木 犀 草 苷 對 照 品 3.12 mg,置 10 mL 棕 色 量 瓶 中,加 甲 醇 至 刻 度,搖 勻,即 得 0.312 mg·mL-1木犀草苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液;再分別精密吸取 0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.2、1.6、2.0 mL 至 2 mL 量 瓶 中,得不同濃度對照品溶液,分別進(jìn)樣 10 μL。以 峰面積積分值(Y),進(jìn)樣量(X,ng)進(jìn)行線性回歸, 回 歸 方 程:Y=1499.7X-18483,r=0.9999,線 性 范 圍 156~3120 ng。供試品溶液的制備:取干燥的中華苦荬菜或提 取物干膏的粉末 1 g,精密稱定,置圓底燒瓶中,精密 加入體積分?jǐn)?shù)為 70% 的乙醇 50 mL,稱重,加熱回流 提取 1 h,放冷,再次稱定重量,用 70% 的乙醇補足減 失的重量,搖勻,濾過,作為供試品溶液。取中華苦荬菜(木犀草苷含量為 3.49 mg·g-1) 50 g,分別加濃度為 50%、70%、90% 乙醇 3 種溶劑 12 倍量,加熱回流提取 3 次,每次 2h,濾過,合并濾液并 回收溶劑,烘干,得干膏。測定各種溶劑對木犀草 苷 的 提 取 率 分 別 為 91.70%、96.46%、75.41%。70% 乙醇提取率最高,因此選擇 70% 的乙醇作為提取溶 劑。從方差分析可以看出,影響中華苦荬菜中木犀 草苷提取率大小的因素依次為:A>D>B,其中 A 溶 媒用量有顯著影響。綜合方差分析和直觀分析,再 結(jié)合生產(chǎn)中的實際情況,考慮到省時、節(jié)約能源和 降低成本等因素,確定中華苦荬菜黃酮部位最佳醇 提取工藝為 A3B2D2,即 12 倍量 70% 乙醇,回流提取 2 次,每次 1.5 h。
3 討論
中華苦荬菜的提取與純化工藝研究中都以木 犀草苷的提取率作為考察指標(biāo),因中華苦荬菜所含 黃酮類成分為其降血糖的效應(yīng)成分,且中華苦荬菜 所含黃酮類成分中以木犀草苷的含量最高,故測定 木犀草苷提取量足以反映總黃酮的提取量,而參照 其他藥物總黃酮提取純化工藝研究中,其中大多選 用蘆丁作為對照品,采用紫外 - 可見分光光度計測 定總黃酮含量,考慮到這樣測定受雜質(zhì)等因素干擾, 結(jié)果誤差較大。因此本實驗選用木犀草苷作為各項 測定的考察指標(biāo)。
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