止血調(diào)經(jīng)顆粒（Zhixue Tiaojing Granule，ZTG） 是湖南安邦制藥有限公司具有知識產(chǎn)權(quán)的獨家品種，處方由黃芪、阿膠、黨參、白芍、當歸、仙鶴 草、茜草、佛手和續(xù)斷 9 味中藥組成，處方來源于阿膠養(yǎng)血膏加減，具有益氣養(yǎng)血、止血調(diào)經(jīng)功能， 用于上環(huán)所致經(jīng)期延長氣血兩虛證者，癥見經(jīng)血過 期不凈、月經(jīng)色淡、神疲乏力、頭暈眼花、少腹墜 脹、色淡、苔薄白、脈細弱。

賽默飛 UltimateTM U3000 系列高效液相色譜 儀，色譜軟件為 Chromeleon Chromatography Data System7.2；AE100 型電子分析天平，十萬分之一， Mettler Toledo 公司；KQ-2200E 型超聲波清洗儀， 昆山市超聲儀器有限公司。

乙腈、甲醇，色譜純，Sigma-Aldrich 公司；PLSW Series 超純水，青海藍天有限公司；對照品芍藥苷 （批號 110736-201842）、毛蕊異黃酮葡萄糖苷（批 號 111920-201606 ）、芒柄花素（批號 111703- 201504），中國食品藥品檢定研究院。黃芪、黨參、 白芍、當歸、仙鶴草、茜草、佛手和續(xù)斷 8 味藥材 均由湖南安邦制藥有限公司提供，所有藥材經(jīng)湖南 安邦制藥有限公司分析質(zhì)量中心楊勇研究員鑒定為 豆科黃芪屬植物蒙古黃芪 Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao 的干燥 根、桔?？泣h參屬植物黨參 Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. 的干燥根、毛茛科芍藥屬植物芍藥 Paeonia lactiflora Pall. 的干燥根、傘形科當歸屬植 物當歸 Angelica sinensis (Oliv.) Diels 的干燥根、薔薇科龍牙草屬植物龍芽草 Agrimonia pilosa Ledeb. 的干燥地上部分、茜草科茜草屬植物茜草 Rubia cordifolia L. 的干燥根和根莖、蕓香科柑桔屬植物 佛手 Citrus medica L. var. sarcodactylis Swingle 的干 燥果實和川續(xù)斷科川續(xù)斷屬植物川續(xù)斷 Dipsacus asper Wall. ex Henry 的干燥根。 10 批次 ZTG 樣品由湖南安邦制藥有限公司研 制生產(chǎn)，具體批號為 20180301（S1）、20180302（S2）、 20180303（S3）、20180601（S4）、20180602（S5）、 20180603（S6）、20180604（S7）、20181001（S8）、 20181002（S9）、20181003（S10）。

色譜柱為 Thermo AcclaimTM 120 C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為純水-乙腈；梯度 洗脫：0～5 min，5%乙腈；5～40 min，5%～35% 乙腈；40～60 min，35%～95%乙腈；檢測波長 254 nm；柱溫 30 ℃；體積流量 1 mL/min；進樣量 10 μL； 理論塔板數(shù)以芍藥苷計不低于 50 000。

精密稱取芍藥苷、毛蕊 異黃酮葡萄糖苷和芒柄花素對照品適量，用甲醇溶 解并定容，配成含芍藥苷質(zhì)量濃度為 1.90 mg/mL、 毛蕊異黃酮葡萄糖苷質(zhì)量濃度為 1.55 mg/mL 和芒 柄花素質(zhì)量濃度為 0.59 mg/mL 的對照品溶液。

取 ZTG 適量，取約 2.5 g，精密稱定，至 25 mL 錐形瓶中，精密加入甲醇 20 mL，稱量，超聲提取 30 min 后，放冷，用甲醇 補足減失的質(zhì)量，搖勻靜止，取上清液過 0.22 μm 微孔濾膜，取濾液，即得。

精密吸取同一 ZTG（S1）供試 品溶液 10 μL，按“2.1”項下色譜條件連續(xù)進樣測 定 6 次，記錄其色譜圖。以 4 號峰（芍藥苷）為參照，計算 11 個共有峰的相對保留時間和相對峰面 積，結(jié)果表明，各特征峰的相對保留時間和相對峰 面積的 RSD 分別為 0.02%～0.10%和 0.38%～ 7.85%，其中，芍藥苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰面 積 RSD 分別為 3.18%和 1.28%，表明儀器精密度良 好，符合指紋圖譜的要求。

取 ZTG（S1）6 份，精密稱定， 按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，精密吸取供 試品溶液 10 μL，分別進樣測定，記錄色譜圖。以 4號峰（芍藥苷）為參照峰，計算 11 個共有峰的相對 保留時間和相對峰面積，結(jié)果表明，各特征峰的相 對保留時間和相對峰面積的 RSD 分別為 0.01%～ 0.14%和 1.16%～9.81%。而芍藥苷和毛蕊異黃酮葡 萄糖苷峰面積 RSD 分別為 3.41%和 1.96%，結(jié)果表明，該方法重復(fù)性好。

考察了以水及 30%、50%、80%、100% 甲醇作為提取溶劑，實驗發(fā)現(xiàn)，樣品在含有水為溶 劑的提取液中，提取的溶劑為棕褐色的，而甲醇提 取液為棕黃色，各提取溶劑提取后的溶液均有不溶 物，含有水為溶劑的提取液無法通過 0.45 μm 的針 式過濾膜，必須經(jīng)過 10 000 r/min、10 min 的離心之 后才能夠濾過，給樣品前處理造成困難，且圖譜由 于含有雜質(zhì)較多，基線偏移度較大，因此綜合考慮， 選用甲醇作為提取溶劑。采用了DAD全波長掃描的方式，通過3D圖譜， 可以看出樣品的峰面積均不太明顯，提取出 220、 240、254、270、300 nm 等波長下的圖譜進行比較， 發(fā)現(xiàn)在 220 nm 等較低的波長段，基線不平穩(wěn)，漂 移度大，在 270 nm 較高波長段的中間洗脫段的峰 形較差，綜合考慮，選取 254 nm 綜合性較好的波 長為檢測波長。在流動相選擇過程中，考慮到中藥復(fù)方制劑成 分復(fù)雜，乙腈的洗脫能力較甲醇強，且使用乙腈做 流動相，色譜柱壓力更低，有利于延長色譜柱的使 用壽命，最后選定乙腈做有機相洗脫。



 

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