菥蓂子系常用藏藥材,藏文名“寨卡”,為十字花科 植物菥蓂的干燥成熟種子,一年生草本植物,藏醫(yī)常用 于清肺熱、腎熱及健胃,主治肺熱、咳嗽、腎熱。在公元 8~9 世紀(jì)創(chuàng)作的藏醫(yī)藥名著《月王藥診》 和《醫(yī)學(xué)四 續(xù)》中均有菥蓂子配方使用的記錄。清代藏醫(yī)藥著作 《晶珠本草》、《藍(lán)琉璃》等稱菥蓂(子)為“折嘎哇”,記 錄其:生長(zhǎng)在松軟的土地及田間;葉濃綠而厚,莖似竹而 枝多,有光澤,花小,白色,果實(shí)似小手鼓,種子小,紅紫 色,表面有明顯的斑點(diǎn)和花紋;味辛,性潤(rùn),有蒜味;清肺 熱、腎熱,治肺病、腎??;開(kāi)胃,燥四肢黃水(即四肢關(guān)節(jié) 腫脹、疼痛等),治培根木布病、黃水病?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)》 中描述其味辛、微溫,主明目、目痛淚出,除痹,補(bǔ)五臟, 益精光。
Linomat 5 半自動(dòng)薄層點(diǎn)樣儀、TLC Visualizer 薄層 色譜數(shù)碼成像系統(tǒng)、winCATS色譜工作站(瑞士卡瑪公 司);LC 20T高效液相色譜儀,包括SPD-M 20A光電二極 管陣列檢測(cè)器、LCsolution色譜工作站(日本島津公司); e 2695高效液相色譜儀,包括2998光電二極管陣列檢測(cè) 器、Empower 3色譜工作站(美國(guó)沃特世公司);BSA 224 S-CW型電子天平、XS 105DU型電子天平(德國(guó)賽多利斯公司);Milli-Q 超純水系統(tǒng)(德國(guó)默克密理博公司); Q250DE超聲波清洗器(昆山舒美超聲儀器有限公司); DK-S16恒溫水浴鍋(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司);聚 酰胺薄膜(浙江臺(tái)州四甲生化塑料廠,批號(hào):20170122, 規(guī)格:10 cm×20 cm);HPTLC Silica gel 60型硅膠GF254高 效薄層色譜板(德國(guó)默克公司,規(guī)格:10 cm×20 cm)。
15批菥蓂子藥材,8批于2017年5-8月采集于青海 省海北州門源縣、海東市互助縣等地區(qū),7批為市售購(gòu)買 樣品,所有樣品均經(jīng)青海省藥品檢驗(yàn)檢測(cè)院駱桂法主任 藥師鑒定為十字花科菥蓂屬植物菥蓂的干燥成熟種子, 即為菥蓂子;黑芥子苷對(duì)照品(北京世紀(jì)奧科生物技術(shù) 有限公司,批號(hào):130201,純度:≥98%);異牡荊素對(duì)照品 (批號(hào):2246,純度:≥99%)、當(dāng)藥黃素對(duì)照品(批號(hào): 4039,純度:≥99%)均購(gòu)自上海詩(shī)丹德生物技術(shù)有限公司;甲醇、乙腈均為色譜純(德國(guó)默克公司);乙酸乙酯、 冰醋酸等其余試劑均為分析純(西隴科學(xué)股份有限公 司);水為超純水。
稱取菥蓂子藥材 30 g,粉 碎,過(guò)50目篩;精密稱取藥材粉末2.0 g,置于錐形瓶中, 加入60%乙醇溶液50 mL,置于90 ℃水浴中加熱回流1 h,過(guò)濾;濾液濃縮至無(wú)醇味(約剩8~10 mL),再加水10 mL,攪勻,用乙酸乙酯振搖提取 2 次,每次 20 mL,棄去 水液,合并乙酸乙酯液,減壓濃縮得到浸膏。然后取浸 膏加甲醇2 mL使溶解,即得。
分別精密稱取當(dāng)藥黃素、異 牡荊素對(duì)照品 5.08、5.12 mg,分別置于 10 mL 棕色量瓶 中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得。
薄層板:聚酰胺薄膜;展開(kāi)劑:三氯甲 烷-甲醇-冰醋酸(11∶1∶1,V/V/V);顯色劑:20 g/L的三 氯化鋁乙醇溶液;點(diǎn)樣量:對(duì)照品溶液 2 μL,供試品溶 液 4 μL。 2.1.4 鑒別結(jié)果 按照“2.1.1”項(xiàng)下方法分別制備15批 次菥蓂子藥材供試品溶液。分別吸取供試品溶液及 “2.1.2”項(xiàng)下異牡荊素、當(dāng)藥黃素對(duì)照品溶液,注入半自 動(dòng)薄層點(diǎn)樣儀,按照“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件點(diǎn)樣、展開(kāi),晾 干,噴以質(zhì)量濃度為20 g/L的三氯化鋁乙醇溶液,晾干, 置于 366 nm 波長(zhǎng)紫外光燈下檢視并拍照。結(jié)果,在 15 批次菥蓂子供試品薄層色譜中,在與當(dāng)藥黃素、異牡荊 素對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn), 其平均比移值分別為0.18、0.72(n=15),色譜圖見(jiàn)圖1。 2.2 樣品中黑芥子苷薄層色譜鑒別 2.2.1 供試品溶液的制備 稱取菥蓂子藥材 30 g,粉 碎,過(guò)50目篩;精密稱取藥材粉末1.5 g,置于錐形瓶中,加入25 mL甲醇,超聲處理(功率:250 W,頻率:50 kHz) 30 min,靜置至室溫,濾過(guò),濾液減壓干燥至近干,殘?jiān)?甲醇適量使溶解,轉(zhuǎn)移至5 mL棕色量瓶中,加甲醇至刻 度,即得。
薄層色譜法能夠快速、靈敏、高效地同時(shí)分離多種 樣品,且固定相和展開(kāi)劑的選擇范圍較大,具有操作方 便、設(shè)備簡(jiǎn)單、分離效率高、專屬性好、分析速度快等特 點(diǎn),能同時(shí)分離多種樣品且斑點(diǎn)明晰鮮艷、直觀,便于鑒 別,彌補(bǔ)了因含有無(wú)紫外吸收、無(wú)揮發(fā)性等成分無(wú)法采 用高效液相色譜法和氣相色譜法進(jìn)行鑒別分析的困境, 近年來(lái)在中藥與民族藥研究領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。 高效液相色譜法在藥材的定性定量分析、質(zhì)量控制方面 使用也十分廣泛,采用該法對(duì)藥材進(jìn)行多組分含量測(cè)定 更有利于控制該藥材的整體質(zhì)量 。因此,本文采取以 上2種成熟、簡(jiǎn)便的方法建立了菥蓂子的質(zhì)量控制方法。