精密稱(chēng)取干燥至恒重的葡萄糖對(duì) 照品 8mg,加水溶解并定容至 100 ml,搖勻,配制得 80 μg /ml 儲(chǔ)備液。6%苯酚溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。精密吸取儲(chǔ)備液 0. 5、1. 0、 1. 5、2. 0、2. 5、3. 0、3. 5 ml 置于 5 ml 容量瓶中,加水稀釋定 容,搖勻,即得對(duì)照品溶液。精密吸取上述系列對(duì)照品溶 液 2. 0 ml,分別加于 10 ml 具塞試管中,加入苯酚 1. 0 ml,搖 勻,迅速加入濃硫酸 5. 0 ml,立即搖勻,放置,冷至室溫。另 取 2. 0 ml 水作空白對(duì)照,于 490 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度( A) , 以葡萄糖含量 C( μg /ml) 為橫坐標(biāo),以 A 為縱坐標(biāo),得回歸 方程 A= 0. 0162C+0. 0076( R2 = 0. 9991) ,表明葡萄糖含量在 8~ 48 μg /ml 與 A 呈良好的線性關(guān)系。 XL-08B 粉碎機(jī)( 廣東市旭朗機(jī)械設(shè)備有限公 司) ; RE- 2000A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀( 上海亞榮生化儀器廠) ; SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵( 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公 司) ; DHG-9075A 型電熱鼓風(fēng)干燥箱( 上海一恒科學(xué)儀器有 限公司) ; BWSsn 電子計(jì)重稱(chēng)( 廈門(mén)佰倫斯電子科技有限公 司) ; XB 220A 電子分析天平; TDL-40B 離心機(jī)( 上海安亭電 子儀器廠) ; UV- 2550 紫外分光光度計(jì)( 日本島津) ; KQ- 500B 型超聲清洗器( 昆山市超聲儀器公司) 。
以活性炭用量、脫色溫度、脫色時(shí)間為 單因素考察指標(biāo)進(jìn)行單因素試驗(yàn),取 18 份 LBP 提取液。以 6 份提取液加活性炭,用 量 依 次 為 0. 5%、1. 0%、1. 5%、 2. 0%、2. 5%、3. 0%,恒溫水浴溫度 60℃ 下脫色 40 min,再分 別離心 30 min,轉(zhuǎn)速為 4000 r/min,總共離心 2 次,測(cè)定脫色 后多糖溶液的吸光度; 以 6 份提取液加活性炭,用 量 為 1. 0%,脫色溫度依次為 40℃、50℃、60℃、70℃、80℃ 和 90℃,再離心30 min,轉(zhuǎn)速為 4000 r/min,總共離心 2 次,測(cè)定脫色后多糖溶液的吸光度; 再以 6 份提取液,加入 1. 0%活性 炭,恒溫水浴溫度為 90℃,脫色時(shí)間分別設(shè)為 20、30、40、50、 60、70 min,再 離 心 30 min,轉(zhuǎn) 速 為 4000 r/min,總 共 離 心 2 次,測(cè)定脫色后多糖溶液的吸光度。