趕黃草，又名扯根菜，為虎耳草科扯根菜屬植 物扯根菜( Penthorum chinense Pursh) 的干燥地上部 分。民間以其全草入藥，性溫、味甘、無毒，具清 熱、利尿、解毒、活血、平肝、健脾、祛黃疸等功效。

現(xiàn)代研究表明趕黃草在保肝、護肝方面功效顯 著，其清熱解毒，保肝退黃的功效與其所含化學(xué) 成分密不可分，其中黃酮類、沒食子酸和槲皮素等 成分均被證明具有抗肝炎病毒和保護肝組織的作 用。為了保證趕黃草的質(zhì)量，需建立可靠的質(zhì) 量評價方法。目前評價趕黃草的方法多采用單一 成分含量的測定。然而中藥療效為多成分、多中 心、多靶點綜合作用的結(jié)果。因此單一成分評價趕 黃草的內(nèi)在質(zhì)量有失偏頗。為較全面地評價趕黃 草藥材的品質(zhì)，采用高效液相色譜法同時測定趕黃 草中有機酸類、黃酮類和黃酮苷類代表成分沒食子 酸、蘆丁、槲皮素和喬松素的含量，以期為趕黃草的 質(zhì)量控制提供理論和實驗依據(jù)。

U3000 UPLC 超高效液相色譜系統(tǒng)、Chromeleon 7 數(shù) 據(jù) 處 理 器: Thermo Fisher Scientific company; FW177 型中草藥粉碎機: 天津市泰斯特儀器有限公 司; AE400 電子天平: 瑞士梅特勒; KQ400 超聲提取 器: 江蘇昆山市超聲儀器有限公司。 磷酸( 分析純) : 國藥集團化學(xué)試劑有限公司; 乙醇( 色譜純) : 默克股份兩合公司; 乙腈( 色譜純) : 默克股份兩合公司; 水為自制超純水。對照品: 沒 食子酸( 供含量測定用，批號: Y19M8C36143，) 、喬 松素( 供含量測定用，批號: 715 － 200111) : 均購自 上海源葉生物科技有限公司; 蘆丁( 供含量測定用， 批號: 110715 － 201006) 、槲皮素( 供含量測定用，批 號: 110715 － 201006) : 購自中國食品藥品檢定研究 院。趕黃草樣品購自浙江省立同德醫(yī)院中藥房，由 浙江省立同德醫(yī)院李洪玉研究員鑒定為虎耳草科 扯根菜屬植物趕黃草。

色譜柱: 資生堂 Capcell Pak C18 ( 250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ; 流動相: 乙腈 － 0. 1% 磷酸水; 柱溫: 30 ℃ ; 檢測波長 254 nm; 流速: 1. 0 mL / min; 進樣體積 10 μL; 梯度洗脫程序見表 1。

2. 2 混合對照品溶液的制備

精密稱取沒食子酸、 蘆丁、槲皮素和喬松素對照品適量，置5 mL 容量瓶， 加甲醇制成 1. 0 g /L 的對照品溶液。 2. 3 供試品溶液的制備 將藥材粉碎，過 20 目篩， 精密稱取趕黃草粉末 0. 5 g，置 25 mL 錐形瓶中，精 密加入 95% 乙醇 20 mL，浸泡 1 h，超聲提取 30 min ( 功率 450 W，頻率 28 kHz) ，放冷，用 95% 乙醇定容 至 25 mL，搖勻，0. 22μm 濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。 2. 4 方法學(xué)考察 2. 4. 1 線性考察 取沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬 松素混合對照品儲備液，加甲醇逐級稀釋，制成 5 個 不同濃度梯度對照品溶液。按方法與結(jié)果“2. 1”項 下色譜條件進樣，以對照品濃度( g /L) 為橫坐標，峰 面積對數(shù)值為縱坐標，得 4 種成分的線性方程。結(jié) 果表明沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬松素在線性范 圍內(nèi)，進樣量與峰面積線性關(guān)系良好，線性方程、線 性范圍、檢測限和定量限結(jié)果見表 2。

2. 4. 2 精密度試驗

取“2. 2”項下對照品溶液，按 方法與結(jié)果“2. 1”項下色譜條件在同一天連續(xù)進樣 6 次，計算日內(nèi)精密度，結(jié)果沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬 松 素 峰 面 積 ＲSD 分 別 為 0. 31% 、0. 39% 、 0. 53% 和 0. 41% 。按方法與結(jié)果“2. 1”項下色譜條 件連續(xù)進樣3 d，計算日間精密度，結(jié)果沒食子酸、蘆 丁、槲皮素和喬松素峰面積 ＲSD 分別為 0. 39% 、 0. 45% 、0. 56% 和 0. 63% ，表明儀器精密度良好。

取同一批趕黃草樣品( 四川 20170918) 6 份，按“2. 3”項下制備，按方法與結(jié)果 “2. 1”項下色譜條件進樣，計算得沒食子酸、蘆丁、 槲皮 素 和 喬 松 素 峰 面 積 ＲSD 分 別 為 1. 35% 、 1. 31% 、1. 54% 和 1. 38% ，結(jié)果表明此方法重復(fù)性良好。

取按“2. 3”項制備的供試品 溶液，按方法與結(jié)果“2. 1”項下色譜條件分別在 0、 2、4、6、8、12、24 h 各進樣一次，計算得沒食子酸、蘆 丁、槲皮素和喬松素峰面積 ＲSD 分別為 0. 35% 、 0. 31% 、0. 61% 和 0. 37% ，結(jié)果表明供試品溶液在 24 h 內(nèi)穩(wěn)定。

取同一批趕黃草樣品( 四 川 20170918) 6 份，按“2. 3”項下制備分別精密加入 等倍的對照品，按“2. 1”項下色譜條件進樣，計算加 樣回收率，見表 3。沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬松 素的 平 均 回 收 率 分 別 為 98. 26% 、101. 16% 、 103. 25% 和 98. 34% ，ＲSD% 均小于 2. 0% 。

3 討論

3. 1 指標性成分的確定

選擇含量相對較高，在有機酸類和黃酮類中具有代表性的的 沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬松素作為含量測定指標。

3. 2 波長的選擇

采用紫外全波段掃描法，對趕黃 草醇提樣品、趕黃草混合標準品進行全波長掃描， 發(fā)現(xiàn)醇提樣品和混合標準品在相同的出峰時間處， 在 220 nm 下均具有最強吸收，觀察色譜峰形和基質(zhì) 效應(yīng)后，發(fā)現(xiàn)在 254 nm 下峰形較好，基線平穩(wěn)，出峰 較多，因此選擇 254 nm 作為檢測波長。

中藥成分提取方法眾 多，且提取效果不盡相同。本實驗為快速有效的提 取趕黃草中的有效成分，采用最為常見的超聲提取 法，以沒食子酸、蘆丁、槲皮素和喬松素為指標性成 分，比較 50% ，75% 和 95% 乙醇作為溶劑對指標性 成分的影響，結(jié)果 95% 乙醇作為溶劑指標性成分含量最高。